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8.点样三薄层色谱第七章平面液相色谱样品溶液的制备：纯品的溶解（用于对照定性）：将纯品直接溶于单一或混合溶剂中，并稀释至一定浓度即可点样；样品的提取及净化：对生物样品（动植物组织、体液等）中某些成分的分离测定时，首先要将样品中的被测成分定量地提取出来，视含量高低稀释或浓缩成一定浓度的样品溶液。对照纯品溶液的浓度与样品的浓度最好相近。8.点样三薄层色谱第七章平面液相色谱要求配制样品的溶剂高度挥发性和尽可能非极性，否则易使斑点扩展。采用多次点加法，第二次点加时应待前一次点加的溶剂挥发后再进行。点样量应适中，过载会引起斑点拖尾，分离度变差，以最小检测量的几倍～几十倍为宜。手工点样工具：定容玻璃毛细管（1–5ul），微量注射器。药典规定：点样基线距底边2.0cm,样点直径2-4mm,点间距离约为1.5-2.0cm。9.展开方式三薄层色谱第七章平面液相色谱多数采用直线形上行展开，薄层板水平角度以75?为最佳。展开距离一般为10-15cm。多次展开：一次展开未达满意分离时，可将薄层板干燥后再次用同一种溶剂展开，可重复多次，直到混合物分离为止。分步展开：混合物性质差别较大时，一种流动相不能有效分离时，可采用不同溶剂依次展开不同距离。连续展开：使到达薄层上缘的溶剂不断蒸发，连续展开以增加展开距离。因无溶剂前沿，需要有个参照物同时展开，以计算相对保留值。9.展开方式三薄层色谱第七章平面液相色谱原点12二维展开：在两个垂直的方向上进行展开。将样品点在薄层板的一个角上，展开适当距离后，挥干溶剂，再将薄层板以与原展开方向成90?的方向进行展开。9.展开方式三薄层色谱第七章平面液相色谱离心展开：薄层板以适当转速旋转时，流动相以适当速率转移到薄层上。该技术主要用于制备色谱。锲尖技术：圆形离心展开具有分辨率高的优点，但需要有一定的仪器装置。采用锲尖技术可以在一般的展开室中进行类似展开。薄层被刮掉部分溶剂前沿10.显色定位三薄层色谱第七章平面液相色谱物理方法：可见光下不显色、但可吸收紫外光，紫外光下显示荧光斑点或荧光淬灭化学方法：加化学试剂显色，要求显色稳定、持久、专属、灵敏、线性良好。常用显色剂为硫酸、碘、磷钼酸、三氯化锑；专属性显色剂主要有改良碘化鉍钾、香草醛－硫酸斑点定位方法：碘；挥发性酸碱：盐酸、硝酸、浓氨水、二乙胺如：碘蒸气法：灵敏、简便，为通用显色法。将碘结晶放在密封的展开缸中，碘的升华，使缸内充满紫色的碘蒸气。将展开后的板挥干溶剂置碘缸中至薄层色谱上出现棕色斑点。放置时间不宜太长，否则背景吸附剂也吸附碘，使信噪比降低。用针头将斑点标记下来，放在通风处使碘挥发。11.定性定量三薄层色谱第七章平面液相色谱定性：色谱鉴定－利用Rf值化学鉴定－试剂显色反应薄层色谱与UV、GC、HPLC、IR、MS、NMR联用定量：洗脱后定量法－UV、HPLC、GC、原位定量法－薄层扫描法、目视比较法（如杂质限度检查方法）四纸色谱第七章平面液相色谱纸色谱利用滤纸作为支持体，吸附在滤纸上的少量水分作为固定相，这是1944年开始出现的一种液-液分配色谱。纸色谱利用滤纸中含约20%的水分作为固定相，样品点放在滤纸上，用有机溶剂展开。纸色谱动画四纸色谱第七章平面液相色谱比移值的重现对确定物质组成有重要意义，若条件选择合适，可以将比值控制在Rf±0.02范围，因而操作中应注意:1）层析分离时温度应恒定，至少差别较小。2）层析器应密闭，以防组分挥发。3）层析器中滤至于层析器要用流动相饱和。4）最好使用同一批滤纸,以使滤纸常数一致。1.获得重现的比移值应注意的事项四纸色谱第七章平面液相色谱纸色谱中，利用物质在水相和有机相中的溶解度不同而彼此分离。如物质在水相中溶解度大则展开时不易移动，Rf值小，相反，如物质在有机相中溶解度大，则展开时移动距离大，Rf值大。因此，为了对多种物质进行分离，必须选择适当的溶剂作展开剂。一般有机化合物在有机溶剂中溶解度皆有一定的差别，所以，可以用水饱和的有机溶剂对许多有机化合物进