口蹄疫样品采集保存运输规范.docxVIP

口蹄疫病料的采集、保存与运送

采集、保存和运输样品须符合下列要求，并填写样品采集登记表。

1样品的采集和保存

1.1组织样品

1.1.1样品的选择

用于病毒分离、鉴定的样品以发病动物(牛、羊或猪)未破裂的舌面或蹄部，鼻镜，乳头等部位的水泡皮和水泡液最好。对临床健康但怀疑带毒的动物可在扑杀后采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品作为检测材料。

1.1.2样品的采集和保存

水泡样品采集部位可用清水清洗，切忌使用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。

1.1.2.1未破裂水泡中的水泡液用灭菌注射器采集至少1毫升，装入灭菌小瓶中(可加适量抗菌素)，加盖密封；尽快冷冻保存。

1.1.2.2剪取新鲜水泡皮3～5克放入灭菌小瓶中,加适量（2倍体积）50％甘油/磷酸盐缓冲液(pH7.4),加盖密封；尽快冷冻保存。

1.1.2.3在无法采集水泡皮和水泡液时，可采集淋巴结、脊髓、肌肉等组织样品3～5克装入洁净的小瓶内,加盖密封；尽快冷冻保存。

每份样品的包装瓶上均要贴上标签，写明采样地点、动物种类、编号、时间等。

1.2牛、羊食道-咽部分泌物(O-P液)样品

1.2.1样品采集

被检动物在采样前禁食(可饮水)12小时，以免反刍胃内容物严重污染O-P液。采样探杯在使用前经0.2％柠檬酸或2％氢氧化钠浸泡5分钟，再用自来水冲洗。每采完一头动物,探杯要重复进行消毒和清洗。采样时动物站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部10～15cm处，轻轻来回移动2～3次，然后将探杯拉出。如采集的O-P液被反刍胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。

1.2.2样品保存

将探杯采集到的7.4～10mLO-P液倒入25mL以上的灭菌玻璃容器中,容器中应事先加有7.4～10mL细胞培养液或磷酸盐缓冲液（0.04mol/L、pH7.4），加盖密封后充分摇匀，贴上防水标签,并写明样品编号、采集地点、动物种类、时间等，尽快放入装有冰块的冷藏箱内，然后转往-30℃或-60℃冰箱冻存。通过病原检测，做出追溯性诊断。

1.3血清

怀疑曾有疫情发生的畜群，错过组织样品采集时机时，可无菌操作采集动物血液，每头不少于10mL。自然凝固后无菌分离血清装入灭菌小瓶中，可加适量抗菌素，加盖密封后冷藏保存。每瓶贴标签并写明样品编号，采集地点，动物种类，时间等。通过抗体检测，做出追溯性诊断。

1.4采集样品时要填写样品采集登记表

2样品运送

运送前将封装和贴上标签，已预冷或冰冻的样品玻璃容器装入金属套筒中，套筒应填充防震材料，加盖密封，与采样记录一同装入专用运输容器中。专用运输容器应隔热坚固，内装适当冷冻剂和防震材料。外包装上要加贴生物安全警示标志。以最快方式，运送到检测单位。为了能及时准确地告知检测结果，请写明送样单位名称和联系人姓名、联系地址、邮编、电话、传真等。

送检材料必须附有详细说明，包括采样时间，地点，动物种类，样品名称，数量，保存方式，及有关疫病发生流行情况，临床症状等。