污染原因防治措施.docxVIP

污染的原因及防治

污染是指在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。污染主要分为细菌污染和真菌污染。细菌污染的特点是菌斑呈黏液状，接种后1～2天就可发现；真菌污染的特点是污染部分长有不同颜色的霉菌，接种后3～10天才能发现。

污染的原因主要有：1、由外植体消毒不彻底，无菌操作不规范，周围环境不清洁、超净工作台过滤装置失效、培养瓶口径过大等造成；2、由内源菌引起的污染，内生菌包括真菌和细菌。在植物组织培养中，由于材料内部的内生菌不能被一般的表面消毒方法所清除，随着材料进入培养过程，引起的污染称为内生性污染或内源性污染。许多植物表面或大气中生存的微生物，可经由植物自然的开口或伤口进入植物内部，而有一些兼性腐生菌或绝对寄生菌，可藉由载体或是拥有一些侵入的机制侵入植物内部，使植物感染病原菌。

防止措施：

1.防止材料带菌的措施

用茎尖作外植体时，可以在室内或无菌条件下结枝条进行预培养。

避免阴雨天在室外采取外植体，晴天采取外植体时，下午比上午好。

对材料内部污染还没有好的灭菌方法，不过除去韧皮部，只接种内部分生组织，可以收到一定的效果。

2.外植体灭菌

对于易污染的外植体可采用多次灭菌法或多种药液交替浸泡法进行消毒。

3.器皿和金属器械的灭菌

玻璃器皿采用湿热灭菌

金属器械一般采用火焰灭菌

4.布制品的灭菌

采用湿热灭菌

5.无菌操作室的灭菌

地面、墙壁和工作台可用2%