牛成肌细胞外泌体分离技术规程.pdfVIP

ICS65.020.30

CCSB43

NXSLX

宁夏饲料工业协会团体标准

T/NXSLX0209—2025

牛成肌细胞外泌体分离技术规程

TechnicalSpecificationforIsolationofBovineMyoblast-DerivedExosomes

2025-11-7发布2025-12-7实施

宁夏饲料工业协会  发布

T/NXSLX0209—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草

规则》的规定起草。

本文件某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由宁夏大学提出。

本文件由宁夏饲料工业协会归口。

本文件起草单位：宁夏大学、宁夏农林科学院动物科学研究所、海原县科学技术局、

固原富民农业科技发展有限公司

本文件主要起草人：魏大为、龚红芳、张久盘、马艺伦、宋雅萍、张娟、马云、张桂

杰、张令锴、胡亚美、聂路玮、姜超、焦若普、杨东梅、田平、何学亮、咸海龙

I

T/NXSLX0209—2025

牛成肌细胞外泌体分离技术规程

1.范围

本文件规定了牛成肌细胞来源外泌体的术语和定义、细胞培养与上清收集、分离纯化

技术、质量鉴定、卫生与安全要求及档案记录等技术要求。

本文件适用于科研机构、检测机构等牛原代成肌细胞及成肌细胞外泌体的分离、纯化

及质量控制相关工作。

2.规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其最新版本

适用于本文件（注：本文件中所涉及到的所有技术规程均遵循中华人民共和国生物安全法，

且相关动物实验按照GB/T35892标准执行）。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T35892实验动物福利伦理审查指南

GB/T43459洁净室及受控环境中细胞培养操作技术规范

GB/T38477基因表达的测定蛋白印迹法

DB51/T3128畜禽遗传材料收集与保存技术规程

DB51/T2075动物源性样品采集操作规程

3.术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1牛成肌细胞外泌体BovineMyoblast-DerivedExosomes

来源于牛成肌细胞分泌的纳米级囊泡，直径范围30nm~150nm，具有脂质双分子层结

构，携带蛋白质、核酸、脂质等生物活性物质，表面表达CD9、CD63、TSG101等特征性

标志物。

3.2牛原代成肌细胞BovinePrimaryMyoblasts

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从牛背最长肌中分离并培养的成肌细胞，保留成肌细胞的生物学特性，可分化为肌管

细胞，是外泌体研究的首选细胞来源。

3.3无外泌体胎牛血清条件培养基ConditionedMediumwithExosome-DepletedFBS

使用预先去除了外泌体的胎牛血清所配制的细胞培养基（15%的无外泌体FBS+1%的100

U/mL青霉素、100μg/mL链霉素+84%的DME