实验室工作总结(2篇).docxVIP

实验室工作总结(2篇)

第一篇：

在过去一年的实验室工作中，围绕基于人源肝癌HepG2细胞模型的天然产物衍生物抗肿瘤活性筛选研究，系统开展了细胞培养、药物处理、活性检测及机制探讨等系列实验。年初完成实验方案设计时，重点优化了细胞模型构建流程，通过比对ATCC标准操作手册与实验室既往protocols，将HepG2细胞复苏后的贴壁时间从传统的24小时调整为18小时，采用0.25%胰酶-EDTA消化液在37℃水浴中精确控制消化时间至90秒，显著提高了细胞存活率（从82%提升至91%）。在细胞传代过程中，严格执行无菌操作规范，每周对超净工作台进行3次紫外消毒（每次30分钟），定期检测CO2培养箱内温湿度及气体浓度，全年累计完成细胞传代126次，污染率控制在0.8%以下。

药物处理阶段建立了梯度浓度筛选体系，选取实验室合成的23个天然产物衍生物，设置0.1μM、1μM、10μM、50μM四个浓度梯度，采用DMSO溶解（终浓度≤0.1%），每孔接种5×103个细胞后24小时进行药物干预。通过MTT法检测细胞活力时，优化了检测波长（490nm）和孵育时间（4小时），使用酶标仪（BioTekELx800）进行吸光度测定，每组设置3个复孔，实验重复3次，确保数据可靠性。其中化合物L-07在10μM浓度下展现出显著抑制效果，细胞存活率降至（32.6±4.1）%，IC50值经GraphPadPrism8.0计算为7.3μM。为验证其作用机制，进一步采用AnnexinV-FITC/PI双染法进行流式细胞术检测，使用BDFACSCantoII流式细胞仪，在488nm激发波长下收集10,000个细胞事件，结果显示L-07处理组早期凋亡率达（28.3±3.5）%，较对照组（3.1±0.8）%显著升高（P0.01）。

在蛋白质水平验证中，建立了Westernblot标准化操作流程：采用RIPA裂解液（含1%PMSF）提取细胞总蛋白，BCA法测定蛋白浓度（Pierce试剂盒），每孔上样量20μg，10%SDS凝胶电泳（恒压80V浓缩胶、120V分离胶），转膜条件为300mA恒流90分钟（PVDF膜，0.45μm孔径），5%脱脂奶粉TBST溶液封闭1.5小时，一抗（Caspase-3兔多克隆抗体，Abcamab13847）4℃孵育过夜，二抗（HRP标记山羊抗兔IgG，CST#7074）室温孵育1小时，ECL化学发光显色（ThermoScientific）。实验结果显示，L-07处理组Caspase-3活化片段（17kDa）表达量较对照组增加2.3倍（灰度值分析采用ImageJ软件）。同时进行了qPCR检测，提取细胞总RNA（TRIzol试剂），逆转录使用PrimeScriptRT试剂盒（Takara），扩增体系含SYBRGreenMasterMix（Roche），在LightCycler480II仪器上进行反应，以GAPDH为内参，结果显示Bax基因mRNA表达上调3.1倍，Bcl-2下调0.4倍，进一步证实了线粒体凋亡通路的激活。

实验过程中累计处理各类样本1,328份，记录原始数据2.7GB，使用Excel建立标准化数据记录表，包含实验日期、样本编号、操作人、仪器参数等18项信息。针对出现的问题如细胞污染（2次），通过及时丢弃污染样本、全面消毒培养箱（75%酒精擦拭+紫外照射）、更换滤膜等措施控制；WB条带模糊问题通过优化转膜缓冲液配方（添加0.05%SDS）、调整一抗稀释比例（从1:1000优化为1:800）得到解决。参与撰写实验报告5份，整理图片素材326张，其中6组代表性结果用于申报发明专利《一种具有抗肿瘤活性的天然产物衍生物及其应用》（申请号20231XXXXXX.5）。协助指导2名本科生完成毕业课题，指导其掌握细胞计数、药物配制等基础操作，其中1名学生的实验数据被纳入发表在《中国药理学通报》的研究论文（2023,39(5):987-993）。

第二篇：

本年度承担新型介孔二氧化硅纳米材料（MSNs）的制备及其药物控释性能研究项目，重点突破了材料孔径调控与表面功能化修饰技术，实现了载药体系的pH响应性释放。实验采用溶胶-凝胶法制备MSNs，以正硅酸乙酯（TEOS）为硅源，十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）为模板剂，在氨水催化下于60℃水浴反应8小时，通过调整TEOS与CTAB摩尔比（1:0.12）、乙醇/水体积比（3:1）及氨水浓度（2.5M），成功合成平均粒径150nm、孔径2.8nm的介孔材料。使用X射线衍射仪（BrukerD8Advance）进行物相分析，在2θ=2.3°处出现典型的（100）晶面衍射峰；透射电镜（TEM，JEOLJEM-2100）观察显示材料具有有序六方介孔结构，比表面积通过B