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动物医学进展,2025,46(2):140-144
ProgressinVeterinaryMedicine
青海血蜱睡液腺组织蛋白质组学分析
蒋硕,李增魁,康明,胡晓宇1,何永彩,陈炳华²,张连生3,陈强,徐璐瑶,
马景花,张枭,邰喜妹,李英1*
(1.青海大学农牧学院,青海西宁810016;2.海东市乐都区芦花乡畜牧兽医站,青海海东810799;
3.海东市乐都区李家乡畜牧兽医站,青海海东810799)
摘要:探索青海血蜱雌、雄成蜱唾液腺中蛋白的调控和变化规律,用非标记定量蛋白组学分析,联合液
相色谱-质谱(I.C-MS/MS)技术,鉴定分析青海血蜱雌、雄成蜱睡液腺组织中的蛋白质,筛选出差异表达蛋
白,对差异表达蛋白进行基因本体论(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)和结构域(IPR)相关功能
富集分析,亚细胞定位以及蛋白互作网络(PPI)分析。结果显示,在青海血蜱雌、雄成蜱睡液腺组织中有506
个上调蛋白和447个下调蛋白。G富集分析表明,差异表达蛋白主要富集在对刺激的反应,KEGG通路主
要富集在嘌呤代谢,结构域主要涉及神经递质门控离子通道等结构域,差异表达蛋白主要定位于细胞核。
PPI分析发现关联度最高的蛋白被注释为细胞色素P450(CYP450)。揭示了青海血蜱雌、雄成蜱睡液腺蛋
白表达的差异,有助于更深入了解蜱的生理功能和调控机制,为抗蜱疫苗的研发提供新思路。
关键词:青海血蜱;睡液腺;蛋白质组学;非标记定量蛋白组学分析
中图分类号:S852.746文献标识码:B
青海血蜱(Haemaphysalisqinghaiensis)是我血蜱雌雄成蜱的唾液腺组织进行蛋白质组学测序,
国特有的蜱种,分布于青海、四川、甘肃、云南、宁夏旨在评估不同性别蜱唾液腺蛋白质的变化,为开发
和西藏等地区,可传播多种血液原虫,如巴贝斯虫和抗蜱疫苗和新药物提供新的研究思路。
泰勒虫等,严重威胁着畜牧业的发展=。唾液腺是1材料与方法
蜱体内最重要的组织之一,在吸血过程中,唾液腺会
1.1材料
向宿主体内分泌大量活性分子,参与抗止血、抗炎和
1.1.1青海血蜱样本青海血蜱(H.qinghaiensis)
免疫调节等多种生理功能,同时,这些活性分子在固
样本均采集自野外,将采集的样品装入试管中,转运
定口器、促进蜱吸血及增强蜱传病原体的传播和
回实验室。
建立等过程中也具有重要作用,因此,研究唾液腺及
1.1.2主要试剂Bradford蛋白定量试剂盒,碧云
其分泌的活性分子是获取蜱功能蛋白的高效途径
之一[2天生物技术有限公司产品;二硫苏糖醇、碘代乙酰
用蛋白质组学研究蜱的报道较少,近年已经分胺、碳酸氢铵、三乙基碳酸氢铵缓冲液和氨水,Sigma
析了美洲花蜱(Amblyommaamericanum)、非洲钝公司产品;十二烷基硫酸钠和尿素,国药公司产品;
缘蜱(Ornithodorosmoubata)血红扇头蜱(Rhipi-质谱级胰酶,Promega公司产品;L.C-MS级超纯水、
cephalussanguineus)、安氏革蜱(DermacentorLC-MS级乙腈和I.C-MS级甲酸,ThermoFisher
andersoni)、长角血蜱(Haemaphysalislongicor-Scientific公司产品;丙酮,北京化工厂有限责任公司
nis)、边缘革蜱(Dermacentormarginatus)和褐黄血产品;ProteoMiner低丰度蛋白富集试剂盒,Bio
蜱(Haemaphysalisflava)等蜱类的蛋白组。蜱唾Rad公司产品。
液腺中具有多种功能的蛋白质是一个非常复杂的分1.1.3主要仪器EASY-nLCTM1200纳升级
子网络,许多蛋白质仍未被发现,
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