微生物的基本培养技术(第二课时)-高二生物同步优质课件(人教版2019选择性必修3).pptxVIP

第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用（第二课时）

学习目标目标010203通过对培养皿和培养基进行灭菌，了解消毒和灭菌的原理及方法。（科学思维）掌握通过配制培养基，了解配制培养基的基本步骤，以及培养基中各类营养物质的配比。（生命观念）通过对酵母菌进行纯培养，理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。（科学探究）

培养基的类型培养基的营养物质常用的消毒方法常用的灭菌方法培养基无菌技术煮沸消毒巴氏消毒化学药剂消毒紫外线消毒湿热灭菌干热灭菌灼烧灭菌按物理性质划分按功能划分微生物的基本培养技术按组成成分划分基本成分：碳源、氮源、水、无机盐特殊需求：维生素（如乳酸杆菌）、碱基等温故知新：培养基的配制和无菌技术问题1：微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想看某种纯净的微生物,当我们掌握了培养基配制和无菌技术后，我们接下来该如何操作？

一、微生物的纯培养（一）培养物、纯培养物、纯培养概念辨析：1.培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。2.纯培养物：由单一个体繁殖所获得的微生物群体。3.纯培养：获得纯培养物的过程就是纯培养。（二）纯培养的步骤：配置培养基灭菌倒平板接种和分离培养

一、微生物的纯培养酵母菌的纯化培养过程（视频）

1.倒平板时(1)为什么需要使锥形瓶的瓶口过火焰？(2)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？(3)怎么确定所倒平板未被杂菌污染？2.平板划线法时注意事项有哪些？3.接种过程中在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？4.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？5.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？合作探究一：请同学们自主学习教材P11-13页，小组合作思考讨论完成问题。一、微生物的纯培养

称取去皮的马铃薯200g切成小块加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂用纱布过滤滤液中加入20g葡萄糖，15~20g琼脂用蒸馏水定容至1000mL得到滤液一、微生物的纯培养（二）纯培养的步骤：1.配制培养基：

将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞包上牛皮纸，并用皮筋勒紧压力100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15~30min取5~8套培养皿培养皿叠成一束用几层牛皮纸包紧放入干热灭菌箱内，160~170℃灭菌2h一、微生物的纯培养（二）纯培养的步骤：2.灭菌：

待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。一、微生物的纯培养（二）纯培养的步骤：3.倒平板：倒平板注意事项：温度：50℃左右冷凝后平板倒置操作：在酒精灯火焰附近

一、微生物的纯培养（二）纯培养的步骤：3.倒平板：问题1：为什么需要使锥形瓶的瓶口过火焰？

一、微生物的纯培养（二）纯培养的步骤：3.倒平板：问题1：为什么需要使锥形瓶的瓶口过火焰？通过灼烧灭菌，防止瓶口微生物污染培养基问题2：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？防止培养基表面的水分过度挥发;防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染问题3：怎么确定所倒平板未被杂菌污染？将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12～24?h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。

实战训练1.下列关于倒平板的叙述，错误的是()A.待培养基冷却至50℃左右时倒平板B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行C.完全打开培养皿皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖D.为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置

平板划线法单个细胞微生物群单个菌落连续划线稀释分散生长繁殖①灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红⑥将皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3-5条平行线，盖上皿盖。⑤试管口通过火焰，并塞上棉塞②在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞③试管口通过火焰④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。（二）纯培养的步骤：4.接种和分离酵母菌：

平板划线法（二）纯培养的步骤：4.接种和分离酵母菌：

平板划线法（二）纯培养的步骤：4.接种和分离酵母菌：划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）12345连续划线法分区划线法平板划线法注意事项（1）接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次（2）划线首尾不能相接（3）每次划线前灼烧接种环进行灭菌（4）划线操作结束后，仍需灼烧接种环

平板划线法（二）纯培养的步骤：4.接种和分离酵母菌：问题4：在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？以免接种环温度太高，杀死菌种。问题5：在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始