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血脂各个项
目的不同测定方法
20XX年XX月
血清脂类测定
血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三、磷脂和非化脂肪酸等。
目前,对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程,均必须检测血浆(清)中的脂类,
通过其含量的变化,对临床疾患提供协助诊断的依据。有关医学科研工作,脂类
的定量检测也是一项必备的研究项目。
1.胆固醇测定
血浆中胆固醇及其的含量检测,从方法学上可分为两大类:一类是化学法包括
抽提法和直接测定法,这种方法目前仍在沿用;另一类是酶法测定,方法敏感特
异快速,并能自动化分析,已常规应用。化学测定法种类多,由于显色反应的特
异性不同,其结果有一定的差异。目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反
应)法。此外,三氯化铁-硫酸反应法Z(ak法)具有显色稳定法、操作简便、灵
敏度约5倍于L-B反应法,胆固醇与游离胆固醇显色程度匕徽接近等优点,缺
点是特异性差,干扰因素比L-B法多,如冰醋酸中含有的乙醛酸,血清样品中的
血红蛋白,胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性,Zak法更
适合于科研使用。酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用,国产试剂已能满足
临床的需要。胆固醇测定用的标准品,按美国国家标准局(NBS)出品纯度达
99.8%,是国际公认的参考物,国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯
品,已供临床检测血清胆固醇使甩
2.甘油三测定
血浆甘油三的测定,目前多以化学法和酶法定量。化学法测定甘油三是以脂
蛋白变性,水解成甘油,并以甘油为计算依据。酶法是以特异酶水解甘油三,
除去脂肪酸,再测定甘油,方法特异,准确而快速,临床广为应用。目前甘油三
测定的方法主要以定量甘油为依据,然而血清样品中存在有游离甘油,如何从
反应过程中的总甘油中减去游离甘油,多年来向来在研究讨论这一问题。若不减
去,其测定值将会高于血清样品中的真值,如果要减去,就必须先测出血清样品
中的游离甘油,甘油三的测定方法将增加一个繁杂的步骤,实际工作中难以做
到。有报导血清样品中的游离甘油实际量是0.07~0.13mmol/L,相当于甘油三
酯的0.5〜6.0mmol/L,为此建议,实测的甘油三酯量减去一个校正系即:
甘油三酯(mmol/L=[0.98x总甘油(mmol/L]-0.07(mmol/L。
这一校正系也仅合用于健康人,对临床病人并不一定合用。据报导,血清样品
的游离甘油向来是个弑口,无法测准。为此,目前临床测定血清甘油三酯时,
基本上未考虑游离甘油,因为其含量很少,暂且忽稍不记。甘油三酯测定的参考
物,推荐三油酸甘油酯和三软脂酸甘油酯混合物(2:1,W/W,此参考物适
用于化学法。在酶法测定中,仍以高纯度的三油酸甘油酯为参考物。
3.磷月颤定
血清磷脂包括卵磷脂、溶血卵磷脂、神经磷脂、脑磷脂和其他少量磷脂。如需要
分别检测各种磷脂,可以通过薄层层析法、柱层析法和高压液相色谱法。目前,
临床仅测定血清磷脂总量。血清磷脂总量的测定方法有化学方法和酶法两大类。
化学法是以磷脂中的磷为定量依据,因为每磷脂份子中都含有一个磷酸根,故将
1.化学法
化学法普通包括:①抽提;②皂化;③毛地黄皂昔沉淀纯化;④显色比色四个阶
段。代表性的方法有Sperry-Webb法,通过①~④步骤操作过程。常规操作中
多采用省去了②、③。或者用省去②、③步骤的Zak-Henly法及省去③步骤的
Abell-Kendall法,现将此法作为标准参考方法予以引用。
2.睹去测定
CE在胆固醇酯酶(cholesterolesterase)作用下水解成FC和NFFA
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