2026年高考生物复习难题速递之基因工程（2025年11月）.docxVIP

第PAGE68页（共NUMPAGES68页）

2026年高考生物复习难题速递之基因工程（2025年11月）

一．选择题（共14小题）

1．关于高中生物学中部分实验的操作，下列叙述正确的是（）

A．“用高倍显微镜观察叶绿体”实验中，先用低倍镜观察叶绿体形态再换高倍镜观察其分布

B．“低温诱导植物细胞染色体数目变化”实验中，卡诺氏液处理的根尖用清水冲洗后再解离

C．“菊花的组织培养”实验中，配制的MS培养基先进行高压蒸汽灭菌然后再调节pH

D．“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验中，将扩增产物与凝胶载样缓冲液混合后再注入加样孔

2．增强型绿色荧光蛋白（eGFP）在自然光下显示绿色。某实验室使用细菌质粒构建含eGFP基因的表达载体，然后将基因表达载体转入细菌，涂布平板后培养。下列叙述错误的是（）

A．通过PCR方法获得eGFP目的片段需要先设计一对特异性引物

B．PCR延伸阶段设置72℃既能保证TaqDNA聚合酶高活性又能防止新合成的产物变性

C．质粒中含有多个不同的限制酶酶切位点不利于eGFP基因与质粒连接

D．若在平板上观察到多个绿色单菌落则说明eGFP基因表达载体构建成功

3．野生马铃薯中S基因的表达与其冷耐受性调控有关。研究者为提高栽培马铃薯的冷耐受性，拟将S基因与质粒重组，再借助农杆菌导入栽培马铃薯中，以增强其抗寒能力。已知S基因两端无限制酶识别序列，转录方向为b端→a端。下列操作不合理的是（）

A．扩增S基因时，b端引物的5端添加BamHⅠ识别序列

B．用含S基因的农杆菌侵染马铃薯细胞，将S基因导入细胞

C．在培养基上添加潮霉素，可筛选被转化的马铃薯细胞

D．可用分子杂交方法检测S基因是否在马铃薯细胞中转录

4．质粒K中含有β﹣半乳糖苷酶基因，将该质粒导入大肠杆菌细胞后，其编码的酶可分解X﹣gal，产生蓝色物质，进而形成蓝色菌落，如图所示。科研小组以该质粒作为载体。采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是（）

A．使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率，可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数

B．如果筛选平板中仅含卡那霉素，生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株

C．因质粒K中含两个标记基因，筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株

D．若筛选平板中蓝色菌落偏多，原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌

5．cDNA文库是以特定组织或细胞在某一发育阶段表达的mRNA为模板，通过逆转录酶合成互补DNA（cDNA），再将其克隆至载体构建的基因集合。该文库仅包含表达基因的编码序列，反映特定条件下的转录信息。利用该文库便于筛选功能基因，广泛应用于基因克隆、功能研究、真核生物基因表达及差异表达分析，下列叙述正确的有几项（）

①水稻cDNA文库中的基因不含有启动子所对应的序列

②水稻cDNA文库中的基因不含有终止密码子所对应的序列

③构建cDNA文库过程中需使用逆转录酶、限制酶和DNA聚合酶等

④从不同组织细胞中提取的mRNA建立的cDNA文库不完全相同

⑤通过定向改变cDNA序列进而改造蛋白质结构属于蛋白质工程

A．四项 B．三项 C．一项 D．零项

6．研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员利用大肠杆菌制备了巨噬细胞表面标志蛋白CD14蛋白，基因CD14的转录方向为从左到右，如图为构建目的基因及载体的相关示意图。下列有关叙述错误的是（）

A．若B链为转录的模板链，则构建基因表达载体时B链的3端与启动子相连

B．用XhoⅠ和SalⅠ双酶切CD14基因和载体，经DNA连接酶连接后，可用限制酶XhoⅠ和SalⅠ对CD14基因的连接方向进行鉴定

C．PCR扩增CD14基因，DNA聚合酶催化引物的5端与加入的脱氧核苷酸的3端形成磷酸二酯键

D．将重组DNA分子导入受体细胞时，可用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于能吸收环境中DNA分子的状态

7．反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如图所示。下列叙述正确的是（）

A．应选择引物2和引物3进行PCR扩增

B．设计的引物中GC碱基含量越高，变性的温度越高

C．PCR产物是包含所有已知序列和未知序列的链状DNA分子

D．整个过程需用到限制酶、DNA连接酶、耐高温DNA聚合酶及逆转录酶

8．生物学实验需要选择合适的实验材料和试剂，下列叙述最合理的是（）

A．选择紫色洋葱鳞片叶外表皮为材料，研究细胞吸水和失水

B．选择H2O2和H2O2酶探究温度对酶活性的影响

C．选择体积分数为95%的冷酒精溶解丝状DNA

D．选择菠菜叶下表皮细胞观察叶绿体的形状

9．在高中生物学实验中，酒精因浓度不同而承担多种角色。下列实