基于量子点的丁香酚快速免疫分析方法的研究与初步应用.pdfVIP

JournalofFoodScienceandBiotechnology第44卷第7期总第304期|2025年7月|食品与生物技术学报

DOI：10.12441/spyswjs.20241126002［文章编号］1673-1689（2025）07-0137-12

基于量子点的丁香酚快速免疫分析方法的研究与

初步应用

1112231*

孙俊杰刘晓霞陈子怡李因来翟璐陈青舟金仁耀

（1.浙江工商大学海洋食品研究院，浙江杭州310012；2.杭州博岳生物技术有限公司，浙江杭州310018；3.杭

州南开日新生物技术有限公司，浙江杭州310051）

摘要：【目的】建立定量检测丁香酚的快速免疫分析方法。【方法】以量子点作为荧光标记物，通过1-（3-二甲氨

基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）（EDC-NHS）偶联方法将丁香酚单克隆

抗体结合至量子点表面，用牛血清白蛋白（BSA）进行封闭，用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳及酶标仪进行鉴定，

并将该方法与高效液相色谱（HPLC）法进行了比较。【结果】量子点免疫探针（QDs-mAb）的最优合成条件为：量

子点活化时间30min，偶联pH8.0，抗体添加量21µL，偶联孵育时间3.0h；最佳缓冲体系：包被缓冲溶液为

0.05mol/L、pH9.6的碳酸盐缓冲溶液（CBS），QDs-mAb缓冲溶液为0.01mol/L、pH7.4的磷酸盐缓冲溶液

（PBS）。在优化条件下建立了量子点荧光免疫分析（quantumdotsfluorescenceimmunoassay，QDs-FIA）法，线性

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拟合方程为y=13.098lnx+9.6258，R=0.9931，IC20、IC50和IC80分别为2.21、21.81、215.49ng/mL；对水样和鲈

鱼肉样本进行回收试验，水样的回收率为96.32%~103.01%，鲈鱼肉样本的回收率为94.16%~102.28%，且变

异系数均小于7%。【结论】作者建立的QDs-FIA法具有较好的检测灵敏度和准确性，可为后期荧光检测试剂

盒的开发提供理论基础。

关键词：丁香酚；单克隆抗体；量子点；荧光免疫分析

ResearchandPreliminaryApplicationofaRapidImmunoassayMethodforEugenol

BasedonQuantumDots

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SUNJunjieLIUXiaoxiaCHENZiyiLIYinlaiZHAILuCHENQinzhouJINRenyao

(1.InstituteofSeaFood,ZhejiangGongshangUniversity,Hangzhou310012,China;2.HangzhouBioeastBiotechCo.,

Ltd.,Hangzhou310018,China;3.HangzhouNankaiBiotechCo.,Ltd.,Hangzhou310051,China)

Abstract:[Objective]Thisstudyaimstoestablisharapidimmunoassaymet