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实验动物检疫规程

实验动物检疫是保障实验动物质量、确保动物实验结果准确性及生物安全的重要环节，需严格遵循科学规范与国家标准。本规程适用于科研机构、高校、医药企业等单位引入实验动物的检疫管理，涵盖小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬、非人灵长类等常见实验动物种类，具体操作需结合《实验动物微生物学等级及监测》（GB14922）、《实验动物寄生虫学等级及监测》（GB14923）等国家标准执行。

一、入场前准备

引入实验动物前，需完成以下准备工作：

1.供应商资质审核：确认供应商持有有效的《实验动物生产许可证》，其生产环境、质量控制体系符合国家标准。要求提供拟引入动物的《实验动物质量合格证》，内容包含动物种类、品系、等级、数量、出生日期、微生物及寄生虫检测结果等信息；同时需提供近3个月内的《实验动物微生物学检测报告》《实验动物寄生虫学检测报告》，检测项目需覆盖目标等级动物的全部必检项（如SPF级小鼠需检测鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒等20余种病原体）。

2.运输方案确认：与供应商协商运输路线及时间，确保运输时长不超过12小时（特殊情况需经评估，最长不超过24小时）。运输容器需符合《实验动物运输包装要求》（GB/T18662），具备通风孔（面积不小于容器表面积的10%）、防逃逸设计，底部铺设吸尿垫料（如经高压灭菌的木屑或纸粒）。运输过程中需保持温度20-26℃、相对湿度40-70%，使用具备温湿度监控功能的运输箱，每2小时记录一次环境数据。

3.隔离设施准备：检疫需在独立隔离区进行，与常规饲养区物理隔离，设置缓冲间（面积≥3㎡）、更衣室（配备专用防护服、口罩、手套）、消毒池（含0.5%过氧乙酸溶液）。隔离区环境需符合目标动物等级要求：普通级动物隔离区需每日通风8次以上，清洁级需达到万级洁净度（空气沉降菌≤3CFU/皿·30min），SPF级需达到千级洁净度（空气沉降菌≤1CFU/皿·30min），并维持5-10Pa正压（相对于缓冲间）。隔离笼具需使用不锈钢或耐高温塑料材质，使用前经121℃高压灭菌30分钟；垫料、饲料需经γ射线辐照灭菌（剂量≥25kGy），饮水为无菌水（电导率≤10μS/cm）。

二、检疫实施流程

（一）接收与初步检查

动物到达后，检疫人员需穿戴专用防护服（一次性连体服或经高压灭菌的棉质服）、N95口罩、乳胶手套，在缓冲间完成以下操作：

1.信息核对：核对运输单与《实验动物质量合格证》信息，确认动物种类、品系、数量（允许±5%误差）、等级、出生日期与实际接收一致。

2.外观检查：观察动物整体状态，记录精神状态（活跃/萎靡）、被毛（光滑/蓬乱）、眼睛（清亮/分泌物）、鼻腔（干燥/流涕）、肛门（清洁/粪污）等。对每只动物进行编号（耳标或芯片），测量体重（误差≤5%），记录异常个体（如体重低于标准值20%、体表溃疡等）。

3.运输应激评估：检查容器内垫料潮湿程度（潮湿面积超过50%需记录）、动物粪便形态（正常为成型颗粒，稀便或血便视为异常），统计运输死亡率（超过3%需启动溯源调查）。

（二）适应性观察期

动物转入隔离笼具后，进入7-14天的适应性观察期（普通级7天，清洁级10天，SPF级14天），每日观察2次（上午9:00、下午16:00），记录内容包括：

-行为学指标：活动度（正常为自由探索，异常为蜷缩、扎堆、攻击行为）、摄食/饮水量（每日记录剩余量，摄入量低于正常水平70%视为异常）。

-生理指标：呼吸频率（小鼠100-200次/分钟，大鼠80-160次/分钟，异常为≥240次/分钟或≤60次/分钟）、体温（小鼠36.5-38.0℃，大鼠37.0-38.5℃，异常为≥39.5℃或≤35.0℃）。

-排泄指标：粪便数量（正常为每日10-20粒/鼠）、颜色（正常为棕褐色，异常为白色、绿色或黑色）、形态（正常为表面光滑颗粒，异常为稀便、带血或黏液）。

观察期内若发现异常个体（如连续2天摄食减少、腹泻、呼吸困难），需立即转移至单独隔离笼（标注“待检”），并记录异常起始时间、症状发展过程。

（三）实验室检测

适应性观察期结束后，进行系统性检测，检测项目根据动物等级及种类确定：

1.微生物学检测：

-细菌检测：采集鼻腔拭子（用无菌棉拭子深入鼻孔0.5cm旋转）、粪便（50-100mg），接种于血琼脂培养基（37℃培养24-48小时），检测沙门氏菌、支气管败血波氏杆菌、泰泽病原体等。SPF级动物需达到“无特定病原体”标准，即不得检出上述细菌。

-病毒检测：采集血清（小鼠眼眶后静脉丛取血0.2-0.3ml，大鼠尾静脉取血0.5-1.0ml），使用ELISA法检测小鼠肝炎病毒（MHV）、仙台病毒（Sendai）、大鼠冠状病毒