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工作研究2024年第12期四川农业科技

SICHUANAERCULTURALSCENGEANDTECHNOLORY

一株PGPR黑曲霉SICU-33的筛选及发酵条件优化

（1.四川农业大学资源学院，成都611130;2.山东中烟工业有限责任公司，山东济南250014；

3.四川省烟草公司�山州公司，四川西昌6150504.西藏自治区农科院农业资源与环境研究所，拉萨850030）

摘要：本研究旨在从青稞的根际土壤中发掘植物根际促生菌（plantgrowthpromotingrhizobacteriaPGPR），并对其进行鉴定和发酵条

件的优化。采用IAA定量检测、对抗病原微生物和溶解无机磷的效果作为评价标准，来筛选出具备PGPR功能的菌种；利用ITS测序

技术来进行分子生物学的识别；基于单因素实验，采用响应面分析（ResponseSurfaceMethodologyRSM）中的Box-Benhnken方法来优

化发酵的条件。本研究从青稞的根际土壤中分离出了一种IAA产量高达52.13mg/L的真菌菌株SICU-33,它能够对抗4种病原菌

的生长，其溶磷圈为2.47±0.09cm，初步的鉴定结果显示为黑曲霉（Aspergillusniger）；经过优化，发酵的最佳条件是pH值为7、葡萄

糖浓度为20g/L、盐的浓度是15g/L,同时培养基量为125mL,最后得到的菌株生物量是2.56g。从青稞根际土中分离出具有抗病促

生效果的一株真菌SICU-33,经系统发育分析鉴定为黑曲霉，并通过响应面法对该菌株的液体发酵条件进行了优化。

关键词：黑曲霉;PGPR；响应面分析；培养基优化

随着中国农业现代化的快速推进，化肥和农药

的用量大幅增加，导致生态环境和土壤健康遭到严等基于单因素试验设计优化了拟蕈状芽孢杆菌

重破坏,如何在农业生产中达到“减肥增效”的目标的发酵条件，优化

是呕须探究的问题[。植物根际促生菌（plant后的SH－1464菌株的次生代谢物产量大幅增

growthpromotingrhizobacteriaPCPR）是一种既不具加[9]。因此优化PCPR发酵条件是增加其生物量和

有致病性也不具有共生性,在植物根际环境中生存其次生代谢物产量的有效途径,更是推进活性菌株

产业化的主要措施之一。综上，筛选出具有PGPR

的腐生微生物群体[2]。这些微生物具有改善土壤

养分状况、增强植物对疾病的抵抗力、促进植物生长效果的真菌并对其发酵条件进行优化，不仅能为微

的优点，从而有助于提升农作物的产量[3-4]。PGPR生物肥料的开发提供高效的菌种资源，且满足可持

不仅对土壤中的有害病原微生物和非寄生性根际有续发展和生态文明建设背景下的农业生产需求。以

害微生物具有生物防治效果，还能促进植物更好地青稞根际土为分离材料，筛选得到一株具有PGPR

吸收和利用矿物质营养[5]。因此分离筛选高效PG-功能的菌株SICU-33,并对其种属进行鉴定。进一

PR,利用PGPR菌株制成微生物菌剂是推进农业绿步利用响应面法对该菌株的液体发酵条件进行优

色发展的有效措施。化,以期为后续研发该菌剂提供理论支撑。

经过几十年的发展,PGPR得到了广泛的研究。

1材料与方法

国内外已经发现的具有防病和促生作用的根际微生

物主要是细菌，包括荧光假单胞菌、芽孢杆菌、根瘤1.1实验材料

菌等多种菌属[6]。而目前发现的具有PCPR效果的1.1.1�青稞根际土青稞根际土由西藏自治区农

真菌还较少。利用PGPR菌株制成的微生物菌剂，科院农业资源与环境研究所的尼玛扎西老师提供，

具有可控性好、成本低、安全友好等特点，而且对植

株生长发育具有一定促进作用,是目前生物防治的分特性是pH6.12,含水量1.