基于环介导等温技术检测人甲流H1N1病毒的响应面优化分析.pdfVIP

·检验医学·中国当代医药2024年6月第31卷第16期

H1N1病毒的

基于环介导等温技术检测人甲流

响应面优化分析

蔡文凯1郝宗杰2苏业保1林艺平3

1.厦门医学院药学系，福建厦门361000;2.武汉兰丁云医学检验实验室有限公司检验科，湖北武汉430000；

3.厦门市集美区疾病预防控制中心检验科，福建厦门361000

[摘要]目的为了建立人甲型流感HIN1病毒的环介导等温扩增(LAMP)体系,本研究以H1N1病毒核酸扩增效率

为指标，通过响应面分析优化探讨LAMP检测H1N1流感病毒的最佳反应条件。方法根据Box-Benhnken响应设

计原理,对影响LAMP反应关键因素（甜菜碱浓度、引物浓度、反应温度)进行三因素三水平响应面法优化。同时

选取60例确诊甲流临床核酸样本和60例健康受试者核酸样本,分别采用聚合酶链反应(PCR)技术和LAMP检

测技术进行比对评估（评估指标包括灵敏度、特异性、准确度）。结果响应面回归模型能较好地预测LAMP检测效

果与甜菜碱浓度、引物浓度和反应温度之间的关系，经过优化LAMP反应体系提高检测灵敏度和缩短反应时间。

同时与PCR检测结果相比，LAMP检测实现100%的灵敏度、98.9%的特异性和99.2%的准确度，检测下限可达

100copies/ml。结论本研究建立的H1N1甲流LAMP检测是一种高效、灵敏、特异性高且不需要复杂设备的检测

方法，适用于基层医疗卫生机构或居家自测，对季节性甲流病毒监测及暴发时应急检测具有重要意义。

[关键词]响应面分析法;环介导等温扩增；甲流H1N1检测；即时检测

[中图分类号]R373.1+3[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2024)6(a)-0116-06

ResponsesurfacemethodologyanalysisfordetectinghumanHiN1in-

fluenzavirusbasedonloop-mediatedisothermalamplificationtechnology

CAIWenkaiHAOZongjie?SUYeyuLINYiping

1.SchoolofPharmacyandPharmaceuticalScience,XiamenMedicalCollege,FujianProvince,Xiamen361000,China;2.WuHan

LandingMedicalLaboratoryCo.,Ltd,HubeiProvince,Wuhan430000,China;3.DepartmentofClinicalLaboratory,

XiamenCityJimeiDistrictCenterforDiseaseControlandPrevention,FujianProvince,Xiamen361000,China

[Abstract]ObjectiveInordertoestablisharing-mediatedisothermalamplificationdetectionsystemforhumanH1N1

influenzavirus,thenucleicacidamplificationefficiencyofHiN1viruswasusedasanindicator,andtoexploreoptimal

reactionconditionsforloopmediatedisothermalamplification(LAMP)detectionof