Site-1蛋白酶通过介导LC3转录调控破骨细胞分化.pdfVIP

S1Pf/f两种破骨细胞S1P条件性敲除小鼠模型，研究在破骨细胞中敲除S1P后对

小鼠骨量的影响。在野生型及S1P敲除小鼠中构建了卵巢切除（OVX）诱导的骨

质疏松模型及脂多糖（LPS）颅骨骨膜下注射诱导的急性骨溶解模型，探究S1P敲

除对两种疾病是否具有保护作用；同时，在野生型小鼠造模后注射S1P特异性抑

制剂（PF429242），研究该抑制剂对于骨质疏松及急性骨溶解模型是否具有挽救作

用。

结果：

在小鼠骨髓单核细胞破骨分化的过程中，S1P基因表达无显著差异但蛋白显著

上调，S1P与ACP5在小鼠OVX及CIA模型中显示出更多的表达及共定位。敲除

S1P或药理性抑制S1P均可阻碍破骨细胞分化及其骨吸收功能，而过表达S1P可

促进破骨细胞分化及其骨吸收功能。小鼠体内破骨细胞S1P条件性敲除可导致明

显的骨硬化，TRAP染色显示S1P敲除小鼠股骨骨小梁表面破骨细胞显著减少。在

破骨细胞分化过程中miR-9-5p表达量逐渐降低并靶向调控S1P表达。骨髓单核细

胞中敲除S1P抑制ATF6和SREBP2的剪切成熟，随后阻碍CHOP/SREBP2复合

体诱导的LC3表达和自噬流，进而破坏破骨细胞生成，过表达LC3后可促进野生

型或S1P缺陷型BMMs形成破骨细胞。此外，我们通过蛋白免疫共沉淀和分子对

接模拟确定CHOP的C3区（含亮氨酸拉链（bZIP）区域）和SREBP2的S5区（含

亮氨酸拉链（LZIP）区域）为二者相互作用的关键区域。小鼠体内S1P敲除或腹

腔注射S1P抑制剂可有效挽救OVX和LPS诱导的骨丢失。

结论：

我们证明S1P通过ATF6/CHOP/LC3及SREBP2/LC3轴调节破骨细胞的分化，

S1P敲除或特异性抑制剂可有效挽救OVX和LPS诱导的体内骨丢失，是骨质疏松

症的潜在治疗靶标。

关键词：骨代谢疾病、Site-1蛋白酶、破骨细胞、自噬、骨质疏松

Site-1proteasecontrolsosteoclastogenesisbymediatingLC3

transcription

ZhejiangUniversitySchoolofMedicine

DepartmentofOrthopaedicSurgery

PostgraduateZeyuZheng

SupervisorFengdongZhao

Abstract

Background:

Site-1protease(S1P)isaGolgi-locatedproteinthatactivatesuniquemembrane-

boundlatenttranscriptionfactors,sushasATF6,SREBPsandGNPTAB,anditplaysan

indispensableroleinendoplasmicreticulumstress,lipidmetabolism,inflammatory

responseandlysosomefunction.S1Pknockoutcausedskeletaldysplasiaorlethalityin

miceandzebrafish.ApatientwithS1Pmutationexhibitssevereskeletaldysplasiawith

kyphoscoliosis,dysmorphicfacialfeaturesandpectuscarinatum.However,whetherS1P

regulatesboneremodelingbyaffectingosteoclastogenesisremainselusive.

Objective:

TostudytheroleofS1Pinosteoclastsanditsmolecularme