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实验三蛋白质的性质实验;一、目的;二、实验原理;Ⅱ、茚三酮反应;;Ⅲ、黄色反应;苯丙氨酸不易硝化,需加入少量浓硫酸才有黄色反应。
;Ⅴ、蛋白质的沉淀及变性;2、不可逆沉淀反应:
此时蛋白质分子内部结构发生重大改变,蛋白质常变性而沉淀,不再溶于原来溶剂中。如加热引起的蛋白质沉淀与凝固,蛋白质与重金属离子或某些有机酸的反应等都属于此类。
蛋白质变性后,有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在(如电荷),并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀,而沉淀的蛋白质也未必都已变性。;一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应,还有那些物质有此反应?但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。
在此设计双缩脲反应有何意义?需要注意他们反应后的颜色及反应速度有何差异;为什么?硫酸铜加入量要控制,否则将会产生蓝色氢氧化铜
;Ⅱ、茚三酮反应操作方法;Ⅲ、黄色反应操作步骤;;Ⅳ、蛋白质等电点的测定;2、重金属离子沉淀蛋白质
取一支试管,加入蛋白质溶液2ml,再加3%硝酸银溶液1-2滴,振荡试管,有沉淀产生。放置片刻,倾出上清液,向沉淀中加入少量的水,沉淀是否溶解?为什么?;3、某些有机酸沉淀蛋白质:
取两支试管,各加入蛋白质溶液2ml,在一支中加入1ml5%三氯乙酸溶液,振荡试管,观察沉淀的生成。放置片刻,倾出上清液,向沉淀中加入少量水,观察沉淀是否溶解。;振摇混匀后,观察各管有何变化。放置片刻。向各管内加水8ml,然后在第2、3号管中各加一滴甲基红,再分别用0.1mol/L醋酸溶液及0.1mol/L碳酸钠溶液中和之。观察各管颜色的变化和沉淀的生成。每管再加0.1mol/L盐酸溶液数滴,观察沉淀的再溶解。解释各管发生的全部现象。;四、结果与分析
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