甘蓝花粉管钙感受蛋白编码基因CML49的克隆及功能鉴定研究.docx

甘蓝花粉管钙感受蛋白编码基因CML49的克隆及功能鉴定研究

摘要

本研究聚焦于甘蓝花粉管钙感受蛋白编码基因CML49，通过构建甘蓝花粉体外高效萌发体系，运用双向电泳及MALDI-TOF-MS技术，成功鉴定出该基因。利用同源克隆、5-Race和3-Race等手段，获得CML49全长cDNA序列，并进行序列分析。构建原核表达载体与反义表达载体，经遗传转化得到转基因植株，对其进行分子检测及功能分析。结果表明，CML49编码317个氨基酸，含2个EF-hand结构域，与拟南芥AtCML49和AtCML50亲缘关系近。反义转基因植株花粉萌发及花粉管生长受抑制