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第39讲基因工程及生物技术安全与伦理问题
[课标要求]5.1.基因工程是一种DNA重组技术。5.2.蛋白质工程是基因工程的延伸。6.1.转基因产品的安全性引发社会的广泛关注。6.2.中国禁止生殖性克隆人。6.3.世界范围内应全面禁止生物武器。
考点一基因工程的基本工具
1.基因工程的概念
2.基因工程的基本工具
(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)
eq\a\vs4\al([提醒])①限制酶的识别序列与被作用的DNA序列是不同的。前者一般由6个脱氧核苷酸组成,少数由4个、8个或其他数量的脱氧核苷酸组成;后者是双链序列。
②判断黏性末端是否由同一种限制酶切割形成的方法是将黏性末端旋转180°,同一种限制酶切割形成的黏性末端应该是完全相同的结构。
③限制酶作用的化学键只能是磷酸二酯键,而不能是氢键。
④在切割含目的基因的DNA分子时,需用限制酶切割两次此DNA分子,产生4个末端。只有这样才能使目的基因的两端都有可连接的黏性末端或平末端。
(2)DNA连接酶
(3)载体
eq\a\vs4\al([提醒])与膜载体的区别:基因工程中的载体是DNA分子,能将目的基因导入受体细胞内,并利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制;膜载体是蛋白质,与细胞质膜的通透性有关。
[答案自填]eq\o(□,\s\up1(1))DNA分子eq\o(□,\s\up1(2))人工“剪切”和“拼接”eq\o(□,\s\up1(3))受体细胞eq\o(□,\s\up1(4))基因产物eq\o(□,\s\up1(5))基因重组eq\o(□,\s\up1(6))原核生物
eq\o(□,\s\up1(7))特定的脱氧核苷酸序列eq\o(□,\s\up1(8))磷酸二酯键eq\o(□,\s\up1(9))磷酸二酯键eq\o(□,\s\up1(10))磷酸二酯键eq\o(□,\s\up1(11))大肠杆菌eq\o(□,\s\up1(12))黏性末端
eq\o(□,\s\up1(13))黏性末端或平末端eq\o(□,\s\up1(14))受体细胞eq\o(□,\s\up1(15))重组DNA分子
(1)基因工程的原理是基因重组,不过这种变异是定向的。()
(2)DNA重组技术所需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体。()
(3)DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键,形成重组DNA。()
(4)E.coliDNA连接酶既能连接黏性末端,又能连接平末端。()
(5)载体的种类有质粒、λ噬菌体、动物病毒等,其中动物病毒必须是DNA病毒。()
(6)质粒载体通常采用抗生素合成基因作为筛选的标记基因。()
答案:(1)√(2)×(3)×(4)×(5)√(6)×
1.(选择性必修3P86正文信息)(1)存在于原核生物中的限制酶的作用是什么?____________________________________________________________
____________________________________________________________。
(2)限制酶来源于原核生物,为什么不能切割自身的DNA分子?___________________________________________________________________。
提示:(1)切割外源DNA以保证自身安全,防止外来病原物的危害(2)原核生物的DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰
2.(选择性必修3P88正文信息)DNA连接酶和DNA聚合酶________(填“是”或“不是”)一回事。原因是:①DNA连接酶连接的是__________,而DNA聚合酶是把单个的__________连接到已有的DNA片段上。②__________起作用时需要以一条DNA链为模板,而________不需要模板。
提示:不是两个DNA片段脱氧核苷酸DNA聚合酶DNA连接酶
1.基因工程的理论基础
2.限制酶的选择原则
(1)根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类
①应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶,以便将目的基因“切出”,如图可选择PstⅠ。
②不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶,防止破坏目的基因,如图不能选择SmaⅠ。
③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种限制酶的切割位点,而且这两种限制酶切割后不会完全破坏标记基因)。
(2)根据质粒的
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