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林木转基因瞬时表达试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.以下哪种方法常用于林木转基因瞬时表达？（）

A.农杆菌介导法B.基因枪法C.电击法D.以上都是

2.瞬时表达载体构建不需要的元件是（）

A.启动子B.终止子C.抗性基因D.着丝粒

3.农杆菌介导林木瞬时表达时，一般侵染的对象是（）

A.种子B.叶片C.根系D.茎段

4.用于检测林木瞬时表达蛋白的常用技术是（）

A.SouthernblotB.NorthernblotC.WesternblotD.PCR

5.瞬时表达周期一般为（）

A.1-2天B.3-5天C.1-2周D.1-2个月

6.下列哪项不是瞬时表达的优点（）

A.快速B.稳定遗传C.方便研究基因功能D.周期短

7.瞬时表达体系中，优化的参数不包括（）

A.菌液浓度B.侵染时间C.培养温度D.植物品种

8.基因枪法介导瞬时表达，微粒载体常用（）

A.金粉B.银粉C.铁粉D.铜粉

9.瞬时表达的外源基因存在形式是（）

A.整合到染色体B.游离于细胞核C.线粒体中D.叶绿体中

10.常用的瞬时表达报告基因是（）

A.GFPB.NPTIIC.GUSD.A和C

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.林木转基因瞬时表达常用的转化方法有（）

A.农杆菌介导法B.基因枪法C.花粉管通道法D.电穿孔法

2.瞬时表达载体的组成元件有（）

A.启动子B.目的基因C.标记基因D.复制原点

3.影响农杆菌介导林木瞬时表达效率的因素有（）

A.农杆菌菌株B.植物基因型C.侵染方式D.共培养时间

4.检测林木瞬时表达的方法有（）

A.荧光定量PCRB.蛋白免疫印迹C.酶活性检测D.观察表型变化

5.与稳定转化相比，瞬时表达的特点有（）

A.表达时间短B.不整合到基因组C.操作简便D.表达水平高

6.基因枪法转化林木的优势包括（）

A.不受宿主范围限制B.转化效率高C.可转化多种组织D.设备简单

7.用于林木瞬时表达的受体材料可以是（）

A.叶片B.愈伤组织C.悬浮细胞D.茎尖

8.优化林木瞬时表达体系的策略有（）

A.调整转化参数B.选择合适载体C.优化受体材料D.更换培养容器

9.瞬时表达可应用于（）

A.基因功能验证B.蛋白互作研究C.启动子活性分析D.品种改良

10.瞬时表达过程中可能遇到的问题有（）

A.表达量低B.污染C.转化效率低D.假阳性

三、判断题（每题2分，共10题）

1.林木转基因瞬时表达的外源基因会稳定整合到基因组。（）

2.农杆菌介导瞬时表达只能用叶片作为受体材料。（）

3.基因枪法转化不需要载体。（）

4.检测瞬时表达只能通过检测蛋白水平。（）

5.瞬时表达体系优化只需要考虑转化方法。（）

6.不同林木品种对瞬时表达效率没有影响。（）

7.荧光定量PCR可用于检测瞬时表达的基因转录水平。（）

8.瞬时表达周期长于稳定转化。（）

9.瞬时表达的外源基因不能正常行使功能。（）

10.共培养时间对农杆菌介导瞬时表达无影响。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述农杆菌介导林木转基因瞬时表达的基本步骤。

答：准备含重组载体的农杆菌，培养至合适浓度；选取健康林木叶片，进行表面消毒；将叶片与农杆菌菌液共培养；之后进行恢复培养；最后检测目的基因的瞬时表达情况。

2.基因枪法介导林木瞬时表达有哪些注意事项？

答：注意微粒载体的准备，确保大小均一；控制轰击压力、距离等参数；防止材料污染；选择合适的受体材料，预处理要恰当；轰击后培养条件需适宜，促进表达。

3.简述检测林木瞬时表达的常用方法及原理。

答：常用荧光定量PCR检测基因转录水平，利用荧光信号定量mRNA含量；Westernblot检测蛋白，通过抗体与目的蛋白特异性结合显色。原理基于核酸或蛋白的特异性识别和检测技术。

4.与稳定转化相比，林木转基因瞬时表达有哪些应用优势？

答：周期短，能快速获得结果；无需整合到基因组，操作简便；可在短期内对多个基因功能进行验证和分析，成本