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林木转基因CRISPR脱靶试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.CRISPR系统中负责识别靶向序列的是（）

A.Cas蛋白B.sgRNAC.tracrRNAD.crRNA

2.以下哪种不是检测CRISPR脱靶的常用方法（）

A.全基因组测序B.T7E1酶切法C.WesternblotD.Digenome-seq

3.提高CRISPR特异性可通过优化（）

A.sgRNA设计B.培养基成分C.培养温度D.载体大小

4.CRISPR脱靶效应可能导致（）

A.目的基因编辑成功B.非靶向基因错误编辑C.细胞死亡D.载体丢失

5.sgRNA与靶序列的互补长度一般为（）

A.10bpB.15bpC.20bpD.25bp

6.以下哪种生物中首次发现CRISPR系统（）

A.植物B.细菌C.病毒D.真菌

7.降低CRISPR脱靶的策略不包括（）

A.提高Cas蛋白浓度B.优化sgRNAC.筛选高特异性Cas蛋白D.改进检测方法

8.脱靶效应会影响林木转基因的（）

A.生长速度B.安全性C.光合作用D.呼吸作用

9.用于林木转基因的CRISPR系统主要来源于（）

A.StreptococcuspyogenesB.EscherichiacoliC.SaccharomycescerevisiaeD.Arabidopsisthaliana

10.检测CRISPR脱靶时，深度测序可检测（）

A.蛋白表达B.脱靶位点C.载体整合D.细胞活性

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.影响CRISPR脱靶的因素有（）

A.sgRNA序列B.Cas蛋白浓度C.基因组复杂性D.细胞类型

2.常用的CRISPR检测技术有（）

A.GUIDE-seqB.CIRCLE-seqC.HTGTSD.Sanger测序

3.优化sgRNA设计可从哪些方面入手（）

A.避免与非靶序列互补B.提高GC含量C.选择合适的PAM序列D.增加长度

4.以下哪些属于CRISPR系统的组成部分（）

A.Cas蛋白家族B.sgRNAC.载体D.启动子

5.降低CRISPR脱靶可采取的措施有（）

A.多轮筛选sgRNAB.使用高保真Cas蛋白C.调整反应条件D.增加sgRNA量

6.脱靶效应可能带来的后果有（）

A.基因突变B.基因表达异常C.生物性状改变D.载体降解

7.在林木转基因中应用CRISPR系统的优势有（）

A.操作简单B.效率高C.可定点编辑D.成本低

8.检测林木CRISPR脱靶时需要考虑的因素有（）

A.样本量B.测序深度C.参考基因组准确性D.实验重复性

9.不同类型的Cas蛋白对脱靶的影响不同，其原因包括（）

A.结合DNA方式B.切割活性C.特异性D.表达量

10.提高CRISPR在林木转基因中特异性的方法包括（）

A.设计双sgRNAB.化学修饰sgRNAC.优化载体D.选择合适的转化方法

三、判断题（每题2分，共10题）

1.CRISPR系统只能用于基因敲除，不能用于基因编辑。（）

2.sgRNA与靶序列完全互补才能发挥作用。（）

3.脱靶效应在所有基因编辑实验中都会出现。（）

4.提高Cas蛋白浓度一定能降低脱靶效应。（）

5.深度测序是检测CRISPR脱靶最准确的方法。（）

6.优化sgRNA设计可以完全消除脱靶效应。（）

7.不同的林木品种对CRISPR脱靶的敏感性相同。（）

8.CRISPR系统在林木转基因中不会引起生物安全问题。（）

9.检测脱靶效应只需要检测一个样本即可。（）

10.载体的选择对CRISPR脱靶效应没有影响。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述CRISPR系统的工作原理。

答：CRISPR系统中，sgRNA识别并结合靶序列，引导Cas蛋白到靶位点，Cas蛋白对靶DNA进行切割，引发DNA双链断裂，细胞通过自身修复机制进行修复，