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2025年动物生物化学实验考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下关于蛋白质变性的描述，错误的是（）

A.变性后蛋白质的一级结构未被破坏

B.重金属离子可通过与蛋白质巯基结合导致变性

C.尿素通过破坏蛋白质分子内部氢键引起变性

D.变性后的蛋白质一定失去生物活性

答案：D（某些蛋白质变性后在复性条件下可恢复部分活性，如核糖核酸酶）

2.测定动物血清中谷丙转氨酶（ALT）活性时，采用赖氏法的关键显色剂是（）

A.2,4-二硝基苯肼

B.考马斯亮蓝G-250

C.邻苯二甲醛

D.茚三酮

答案：A（ALT催化丙氨酸与α-酮戊二酸生成丙酮酸，丙酮酸与2,4-二硝基苯肼反应生成苯腙显色）

3.提取动物肝脏线粒体DNA时，需加入EDTA的主要目的是（）

A.抑制DNA酶活性

B.维持溶液渗透压

C.促进细胞膜破裂

D.中和核酸负电荷

答案：A（EDTA可螯合Mg2?，而DNA酶依赖Mg2?发挥作用，从而抑制酶活性保护DNA）

4.某实验中使用分光光度计测定样品吸光度时，若比色皿外壁有残留液体未擦干，会导致（）

A.吸光度测定值偏高

B.吸光度测定值偏低

C.不影响测定结果

D.无法判断

答案：A（残留液会额外吸收或散射光，导致透过光减少，吸光度（A=-lgT）偏高）

5.以下关于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）的描述，正确的是（）

A.分离依据是蛋白质的等电点差异

B.样品需在非变性条件下处理

C.分子量越大的蛋白质迁移速度越快

D.SDS的作用是使蛋白质亚基解离并赋予均一负电荷

答案：D（SDS与蛋白质结合后使其带负电，电荷密度趋于一致，迁移率仅与分子量相关）

6.测定动物肌肉中糖原含量时，需先用三氯乙酸处理样品，其主要目的是（）

A.沉淀蛋白质，去除干扰

B.水解糖原为葡萄糖

C.激活糖原磷酸化酶

D.维持反应体系pH稳定

答案：A（三氯乙酸是蛋白质沉淀剂，可去除样品中的蛋白质，避免其与后续显色试剂反应）

7.某实验需配制0.1mol/LTris-HCl缓冲液（pH8.0），若实验室仅有Tris碱（pKa=8.1），需通过以下哪种方式调节pH？（）

A.加入NaOH溶液

B.加入HCl溶液

C.加入NaCl溶液

D.无需调节，Tris碱溶解后pH自然为8.0

答案：B（Tris碱溶液呈碱性，需加HCl中和部分OH?，使溶液pH降至8.0）

8.采用荧光法测定动物血浆中维生素A含量时，需避免强光照射，主要原因是（）

A.维生素A在光照下易氧化分解

B.荧光物质受光激发后会发生淬灭

C.强光会导致仪器检测器饱和

D.光照会改变溶液温度影响荧光强度

答案：A（维生素A含共轭双键，易被光氧化失活，导致测定结果偏低）

9.以下关于酶联免疫吸附试验（ELISA）的操作步骤，正确的顺序是（）

①加待测样品②加酶标二抗③包被抗原④加底物显色⑤洗涤⑥加一抗

A.③→①→⑤→⑥→⑤→②→⑤→④

B.③→⑥→⑤→①→⑤→②→⑤→④

C.①→③→⑤→⑥→⑤→②→⑤→④

D.③→①→⑥→⑤→②→⑤→④→⑤

答案：A（包被抗原→加待测样品（含抗体）→洗涤→加一抗（若待测样品为抗原则需调整）→洗涤→加酶标二抗→洗涤→加底物显色）

10.分离动物血清中白蛋白和球蛋白时，常用硫酸铵分级沉淀法，其中球蛋白沉淀所需的硫酸铵饱和度通常（）

A.低于白蛋白

B.高于白蛋白

C.与白蛋白相同

D.无法确定

答案：A（球蛋白的溶解度较低，在较低硫酸铵饱和度（如20%-30%）即可沉淀，白蛋白需更高饱和度（如50%-60%））

二、简答题（每题8分，共40分）

1.简述双缩脲法与Folin-酚法测定蛋白质含量的原理及主要区别。

答案：

双缩脲法原理：在碱性条件下，蛋白质中的肽键（-CO-NH-）与Cu2?结合生成紫红色络合物，颜色深浅与蛋白质浓度成正比（λmax=540nm）。

Folin-酚法原理：第一步为双缩脲反应（Cu2?与肽键结合），第二步中磷钼酸-磷钨酸（Folin试剂）被蛋白质中的酪氨酸、色氨酸残基还原生成蓝色化合物（λmax=750nm），灵敏度高于双缩脲法。

主要区别：①显色基团不同：双缩脲法依赖肽键，Folin-酚法同时依赖肽键和芳香族氨基酸；②灵敏度不同：Folin-酚法（μg级）远高于双缩脲法（mg级）；③干扰因素不同