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流感技术指南

流感病毒属于正粘病毒科,为单股负链RNA病毒,根据核蛋白(NP)和基质蛋白(M1)抗原性不同分为甲(A)、乙(B)、丙(C)、丁(D)四型。其中甲型流感病毒(IAV)和乙型流感病毒(IBV)是引起人类季节性流行的主要病原体,丙型流感病毒仅引起轻微上呼吸道感染,丁型流感病毒主要感染牛等动物,尚未发现感染人类的明确证据。

一、病原学特征

流感病毒颗粒呈球形或丝状,直径80-120nm,外层为脂质包膜,表面嵌有两种主要糖蛋白:血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。HA负责与宿主细胞表面唾液酸受体结合并介导病毒包膜与宿主细胞膜融合,NA则通过水解唾液酸促进子代病毒从宿主细胞释放。甲型流感病毒的HA和NA存在多种亚型(如H1N1、H3N2),乙型流感病毒分为Victoria和Yamagata两个系。

病毒基因组由8个节段(乙型为8个节段,丙型为7个)组成,这种分节段特性使其易发生基因重配(抗原转换),导致新型流感病毒株出现,引发大流行;同时,HA和NA基因的点突变可导致抗原漂移,使病毒逃逸人群免疫保护,引起季节性流行。流感病毒对乙醇、碘伏、碘酊等常用消毒剂敏感,对紫外线和热敏感(56℃30分钟可灭活),但在0-4℃能存活数周,-70℃以下或冻干可长期保存。

二、流行病学特征

传染源:主要为流感患者和隐性感染者。患者自发病前1-2天至发病后5-7天(儿童可达10天)均具有传染性,发病3天内传染性最强。

传播途径:主要通过呼吸道飞沫传播(咳嗽、打喷嚏、说话产生的飞沫),也可通过接触被病毒污染的物品(如门把手、手机)后触摸口、鼻、眼等黏膜感染。在相对封闭、通风不良的环境中,可能存在气溶胶传播风险。

易感人群:人群普遍易感,感染后可获得一定免疫力,但由于病毒抗原变异,保护力持续时间有限(通常6-12个月)。儿童(尤其5岁以下)、老年人(65岁以上)、孕妇、慢性基础疾病患者(如慢性阻塞性肺疾病、糖尿病、慢性肾病、免疫缺陷)为重症高风险人群。

流行特征:季节性流感在温带地区多发生于冬春季节(11月至次年3月),热带和亚热带地区可全年流行,高峰多在雨季。甲型流感病毒易引起大流行(如2009年H1N1大流行),乙型流感病毒多引起局部暴发或小流行,丙型流感病毒呈散发。

三、临床表现与重症预警

典型流感:起病急骤,潜伏期1-4天(平均2天),主要表现为高热(体温39-40℃)、畏寒、头痛、全身肌肉关节酸痛、乏力等全身症状,可伴咽痛、干咳、鼻塞、流涕等呼吸道症状,部分患者出现恶心、呕吐、腹泻(儿童多见)。体检可见结膜充血、咽部充血,肺部体征多不明显。

非典型表现:

-轻型流感:症状轻微,发热不明显或仅低热,全身症状和呼吸道症状轻,病程1-3天。

-胃肠型流感:以呕吐、腹泻为主要表现,发热及全身症状相对较轻,多见于儿童。

-肺炎型流感:可由流感病毒直接感染或继发细菌/真菌性肺炎引起,表现为持续高热、剧烈咳嗽、咳脓性痰或血痰、呼吸急促、发绀,肺部可闻及湿啰音,胸部影像学显示片状浸润影或间质性改变。

重症预警指标:

-持续高热(>3天)或体温复升;

-呼吸频率增快(成人>30次/分,儿童>40次/分(<5岁)或>20次/分(≥5岁));

-静息状态下氧饱和度≤93%;

-出现意识障碍(如嗜睡、谵妄);

-严重呕吐、腹泻导致脱水;

-原有基础疾病(如心脏病、慢性肺病)加重;

-儿童出现拒食、抽搐、紫绀或尿量明显减少;

-实验室检查提示乳酸升高(>2mmol/L)、淋巴细胞持续减少、C反应蛋白显著升高(>40mg/L)。

四、实验室检测技术

1.病原学检测

-核酸检测:实时荧光定量PCR(RT-PCR)是诊断流感的“金标准”,可检测病毒RNA并区分型别、亚型(甲型)或系别(乙型),灵敏度高(可达10-100拷贝/反应),检测时间2-4小时。采样应在发病3天内(最好24小时内)进行,推荐采集鼻咽拭子或咽拭子(儿童可采集鼻腔吸取物),标本需冷藏(4℃)保存并在24小时内送检,若需长期保存应置于-70℃。

-快速抗原检测:采用胶体金或免疫荧光法检测病毒核蛋白或HA抗原,操作简便(15-30分钟出结果),但灵敏度较低(约50%-70%),易出现假阴性,阳性结果需结合临床综合判断,阴性结果不能排除流感诊断。

-病毒分离培养:将标本接种于鸡胚或Madin-Darby犬肾细胞(MDCK),通过观察细胞病变或HA试验确认病毒存在,主要用于病毒株型别鉴定和耐药性监测,耗时5-7天,不适合临床快速诊断。

2.血清学检测

采集急性期(发病7天内)和恢复期(发病2-4周)双份血清,检测流感病毒特异性IgG抗体。若恢复期抗体

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