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小鼠卵巢结构的冰冻切片观察
姓名:
专业:生物科学
指导教师:
背景卵巢作为雌性的生殖器官,具有生殖和内分泌功能。随着越来越多生殖问题的出现,对于卵巢的研究备受重视。小鼠由于自身的特殊性广泛用于生物学实验。
目的1.观察卵巢显微结构,识别各类卵泡结构。
2.熟练掌握冰冻切片和HE染色法技术要领,体会影响
切片质量的各种因素。
3.对比石蜡切片,选择最佳切片方法。
背景与目的
实验材料与方法
实验材料:3-4周龄KM系正常雌性小鼠2只;
生理盐水、各级乙醇、苏木素染液、伊红染液、
OCT、1×APE、1×PBS、强酸洗液、丙酮、二甲苯、
中性树脂等。
试验方法:1.制备载玻片
2.取材
3.液氮速冻
4.冰冻切片
5.HE染色
6.封片观察
实验结果
在HE染色的作用下,显微镜下观察到细胞核被苏木精染成蓝色,细胞质被伊红染成粉红色。
图1.3周龄小鼠卵巢(10×)
图3.4周龄小鼠卵巢(40×)
箭头所指为初级卵泡
图2.3周龄小鼠卵巢(40×)
箭头所指为原始卵泡
结论
冰冻切片快速﹑简便,能够较好地保存各种抗原和酶的活性。但也有局限性,例如切片较厚,不易做连续接片,切取组织块不宜太大等。
对于卵巢观察而言,由于成熟卵泡的空腔中充满卵泡液,容易产生冰晶,所以卵巢的冰冻切片效果并没有石蜡切片的好。但在快速病理诊断中还是冰冻切片可行性好。
谢谢
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