第三章-药用菌的生理.pptVIP

第三章药用菌的生理;第一节药用菌的生长;菌丝的生长;以顶端生长方式进行，有分支现象。

一、顶端生长

孢子→芽管→以顶端为生长点，向各方向均等生长→菌落。

;2、菌丝顶端的构造：包括延伸区、硬化区、次生壁形成区、成熟区、隔膜区。

菌丝顶端延伸区和硬化区的内层是几丁质层，外层为蛋白质层；次生壁形成区就是亚顶端部位，其由内至外是几丁质层、蛋白质层和葡聚糖蛋白网层；再下面就是成熟区，其由内至外相应地为几丁质层、蛋白质层、葡聚糖蛋白质层和葡聚糖层；最后就是隔膜区。

真菌细胞壁特征性地含有几丁质，使细胞壁坚韧；也含有蛋白质、甘露聚糖和葡聚糖等无定型物质，它们混在上述纤维状物质构成的网内或网外，充实了细胞壁的结构。;(一)顶端生长机制--泡囊学说（Grove，1970年）

1.内容

（1）菌丝顶端1-2μm的顶部区域含有大量的泡囊；

（2）泡囊来源于内质网，后转移至高尔基体，在高尔基体中进行浓缩加工，获得类原生质膜的泡囊膜；

（3）泡囊从高尔基体中释放，转移到菌丝顶端，与原生质膜结合，其内含物释放到膜壁之间用来合成细胞壁，泡囊膜融入原生质膜，增加膜的面积，导致菌丝顶端的生长。;2.泡囊的三重作用

（1）细胞壁溶解酶破坏原壁；

（2）运输新的壁物质，在壁合成酶作用下并入细胞壁中，增加壁面积；

（3）泡囊膜也并入细胞膜→增加细胞膜面积。;A含细胞壁水解酶的泡囊与细胞膜融合

B原壁被破坏；

C含合成酶的泡囊与膜融合；

D新细胞壁物质通过膜向外扩散；

E新的细胞壁单位合成;3.注

（1）生长停止，顶端泡囊消失，在细胞中分散开，生长时，再聚集在顶端。

（2）顶端生长可受外界影响，如多氧霉素D（几丁质酶抑制剂）可导致细胞壁破裂；香豆素（纤维素合成的抑制剂）可抑制菌丝生长和分支。;（二）、顶端生长的驱动力

1.细胞质的流动并带动泡囊移向顶端；

2.顶端和亚顶端区域间的水的电位梯度差；

3.由微管（与菌丝生长方向平行）牵动泡囊到菌丝顶端，或先运送到顶体，然后再运输到菌丝顶端。;二、分支生长

1.分支→菌丝融合→质配、核配→异核现象。

2.分支产生方式

与泡囊??聚集有关，与顶端生长的机制相似，分支产生模型（2种）。

（1）泡囊和一些特殊的细胞质区段间存在电位差→泡囊向局部区域聚集；

（2）泡囊形成速率大于融合CM速率→大量积累→超过细胞体积临界量→任何部位产生分支。;丝状真菌用液体振荡或深层通气法培养时，以菌丝干重为指标，发现与细菌相似的生长规律。

1、生长迟缓期

孢子和菌丝在新的培养环境中需要一个适应过程，接种后出现出延滞期。

生长迟缓期的长短与菌种的菌龄、长势及环境条件有关。

;2、快速生长期

菌丝迅速生长（几小时至几天）。

菌丝体干重迅速增加，其立方根与时间呈直线关系。菌丝伸长和分枝速率加快。呼吸强度和代谢速率均达到高峰，产生或不产生酸类等代谢产物。在静止培养时，此期末将在液体表面形成菌膜和分生孢子，振荡或通气搅拌培养时，成为絮状。;3、生长停滞期

菌丝干重逐渐减少，培养液中出现较多的氮和磷，菌丝开始自溶。

生长速度减慢和菌丝干重下降。除少数新生菌丝外，多数菌丝细胞质中开始出现较大的空泡和贮存物颗粒，老菌丝开始自溶，多数次生代谢产物(如抗生素等)也在本期内合成。

;;第二节药用菌生长的测定

主要是菌丝体生长量的测定。

一、直线生??的测定

1.菌丝生长的测定

（1）点接菌株在平板中心→培养→将平板至于显微镜台上→校对目镜测微尺→计算每一格的长度；

（2）低倍镜下，在菌落边缘选择单根菌丝的顶端→将目镜测微尺与菌丝平行，选择开始出现侧枝的部位与目镜测微尺上的一条线重合，即设定“参照点”。;（3）每隔一段时间测定菌丝生长的长度，观察数次后，根据时间和顶端延长生长的长度划一条生长曲线，求出生长速度（mm/h）。

2.菌落生长速度的测定

将菌株点种在平板上，每隔一段时间测定菌落的半径或直径，以时间和直径或半径做曲线，在一定限度内生长量和时间呈直线关系。;3.直线生长速率的测定

在“U”形培养管中进行，该管长40cm，内径1.3cm，在两端5cm处弯成45°角。

在培养管中加入适量的融化琼脂培养基，达到培养管直径的一半→两端加棉塞后灭菌→凝固后从一端接种后→按时测定生长距离，并计算生长率。

二、菌丝干重法

液体培养后，过滤菌丝、洗涤、离心、烘干、称量干重。仅适用于菌体浓度较高的样品。;营养物质能否被微生物利用的一个重要因素是这些营养物质能否

进入微生物细胞。只有营养物质进入细胞后才能被微生物细胞内

的新陈代谢系统分解利用，才能保证微生物的正常生长繁殖，

影响营养物质进入细胞的因素有三种：;菌丝体可从环境吸收水分与矿物质，也透过胞外消化吸收有机养分。首先菌丝释放酵素到周围的基质中