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猪脑提取物检验标准操作程序

文件目录：

TOC\o1-1\h\z\u13711.目的 2

217832.适用范围 2

227963.职责 2

150774.定义 2

139865.主要内容 2

246416.派生记录 6

191537.相关文件 6

233088.附件 6

266299.修订历史 6

1.目的

为规范和指导猪脑提取物的检验操作步骤及技术要求。确保实验结果的准确性，特制订本程序。

2.适用范围

本程序适用于猪脑提取物的检验。

3.职责

质量控制室人员：负责该程序的起草

质量控制室主任：负责该程序的审核

质量总监：负责该程序的批准

4.定义

不适用

5.主要内容

5.1引用标准

《猪脑提取物内控质量标准》

5.2品名猪脑提取物

5.3性状

本品为微黄色至黄色的溶液。

5.4鉴别

5.4.1取本品适量，加水稀释制成每1ml约含总氮0.5mg的供试品溶液。取供试品溶液2ml，加茚三酮试液数滴，加热，应显蓝色。

5.4.2取本品适量，加水稀释制成每1ml中约含总氮0.5mg的供试品溶液，取供试品溶液2ml，加双缩脲试液（取硫酸铜1.50g和酒石酸钾钠6.0g，加水500ml使溶解，边搅边加入10%氢氧化钠溶液300ml，用水稀释至1000ml，混匀）4ml，应显紫红色。

5.5检查

5.5.1pH值

取本品10ml，参见《pH值测定法标准操作规程》，依法测定，pH值应为7.0～7.3。

5.5.2蛋白质

取本品适量，加水稀释成每1ml约含总氮0.5mg的供试品溶液。取供试品溶液2ml，加20%磺基水杨酸溶液2ml，溶液应澄清。

5.5.3高分子量杂质

参见《分子排阻色谱法标准操作规程》，依法测定。

色谱条件与系统适用性试验用亲水改性硅胶为填充剂（如TSKGEL2000SWxl7.8mm×300mm,5um）；流动相为三氟醋酸-乙腈-水（0.05：10：90）；检测波长为214nm。理论板数按胰岛素峰计算应不低于3000。

测定法取本品适量，加流动相制成每1ml含总氮0.5mg的溶液，作为供试品溶液。另取胰岛素（分子量5800）适量，用流动相制成每1ml中含1mg的溶液，作为对照品溶液。取对照品溶液和供试品溶液各10ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按面积归一化法计算，保留时间小于胰岛素峰的峰面积之和不得过4.0％。

5.5.4细菌内毒素

取本品适量，加细菌内毒素检查用水稀释制成每1ml约含总氮0.5mg的供试品溶液。取供试品溶液，参见《细菌内毒素检查法标准操作规程》，依法检查，每1ml中含内毒素的量应小于1Eu。

5.5.5异常毒性

取本品适量，用灭菌的生理盐水稀释成每1ml约含总氮0.5mg的供试品溶液，取供试品溶液，参见《异常毒性检查法标准操作规程》，依法检查，按静脉注射给药，应符合规定。

5.5.6过敏反应

取本品适量，加氯化钠注射液稀释制成每1ml约含总氮0.5mg的供试品溶液。取供试品溶液，参见《过敏反应检查法标准操作规程》，依法检查，应符合规定。

5.5.7降压物质

取本品适量，加氯化钠注射液稀释制成每1ml中约含总氮0.5mg的供试品溶液，参见《降压物质检查法标准操作规程》，依法检查，剂量按猫体重每1kg注射0.2ml，应符合规定。

5.5.8微生物限度

取本品，采用平皿法进行细菌、霉菌及酵母菌计数，采用常规法进行控制菌检查，参见《微生物限度检查法标准操作规程》，依法检查，细菌数、霉菌和酵母菌总数每1ml不得过10cfu，大肠埃希菌、沙门菌不得检出。

5.6含量测定

5.6.1多肽

操作方法对照品溶液的制备：精密称取酪蛋白对照品适量，加0.05mol/L氢氧化钠试液制成每1ml中约含7mg的溶液。

供试品溶液的制备：取本品适量，加水稀释制成每1ml中约含总氮0.5mg的溶液。精密量取供试品溶液2.0ml，置试管中，精密加入双缩脲试液（取硫酸铜1.50g和酒石酸钾钠6.0g，加水500ml使溶解，边搅边加入10%氢氧化钠溶液300ml，用水稀释至1000ml，混匀）4ml，混匀，室温放置30分钟，参见《紫外-可见分光光度法标准操作规程》，在540nm的波长处测定吸光度。精密量取酪蛋白对照品2.0ml，自“置试管中……”起，同法操作，测定吸光度，计算，乘以稀释倍数，即得。

本品每1ml含多肽应不少于9.6mg。

计算公式：

式中A为吸光度值；C为测试液浓度（以mg/ml计）

允许误差参见《检验工作管理程序》

5.6.2总氮

操作方法