DB41T 3027-2025 花椒组织培养快繁技术规程.docxVIP

ICS65.020.01CCSB05

ICS

65.020.01

CCS

B05

河 南 省 地 方 标 准

DB41/T3027—2025

花椒组织培养快繁技术规程

2025-10-30发布 2026-01-29实施

河南省市场监督管理局 发布

DB41/T3027—2025

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I

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II

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目 次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4缩略语 1

5培养前准备 2

6培养基配制 2

7外植体处理 2

8芽诱导 2

9增殖培养 2

10生根培养 3

11炼苗与移栽 3

12档案管理 3

附录A（资料性）WPM培养基成分 4

附录B（资料性）MS营养液成分 5

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河南省林业局提出并归口。

本文件起草单位：河南省林业科学研究院、河南农业大学。

本文件主要起草人：王文君、翟晓巧、任媛媛、王念、侯志华、何威、董玉山、陈超、王星斗。

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花椒组织培养快繁技术规程

范围

本文件规定了花椒组织培养快繁的术语和定义、缩略语、培养前准备、培养基配制、外植体处理、芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗与移栽、档案管理等内容。

本文件适用于花椒的组织培养快繁育苗。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

花椒

花椒（ZanthoxylumbungeanumMaxim.）为芸香科花椒属落叶小乔木，枝具短刺，小叶对生。顶生花序，花被片黄绿色，雌花常无发育雄蕊。果紫红色，分果瓣具油点。花期4～5月，果期8～9月或10月。

外植体

从植株上切取下来用于建立组织培养体系的离体植物器官或组织。

芽诱导

将培养材料在诱导培养基中进行培养，诱导分化出不定芽的过程。

增殖培养

将诱导产生的不定芽转移到增殖培养基进一步扩大培养的过程。

生根培养

将诱导产生的芽转移到生根培养基中诱导生根从而形成完整植株的过程。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

6-BA：六苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine）NAA：萘乙酸（NaphthaleneAceticAcid）

TDZ：噻苯隆（Thidiazuron）

IBA：吲哚丁酸（IndolebutyricAcid）WPM：WPM基本培养基（WoodyPlantMedium）

MS：MS培养基（MurashigeandSkoogculturemedium）

培养前准备

器械灭菌

将培养容器瓶、剪刀、镊子、解剖刀等接种器械用灭菌袋包好，置于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min。

无菌水准备

根据生产需要，取适量蒸馏水于三角瓶等容器中，高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌20min，之后取出备用。

培养基配制

以WPM为基本培养基进行培养基配置（WPM培养基成分见附录A）。

芽诱导及增殖培养基为WPM+0.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+0.003mg/LTDZ+20g/L蔗糖+5.0g/L琼脂。生根培养基为WPM+1.5mg/LIBA+0.1mg/LNAA+35g/L蔗糖+4.5g/L琼脂。

将配置好的培养基分装至培养瓶中（常用容量为350mL，1L培养基可分装10～12瓶），分装后封口、标记，置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌。培养基的配制程序按照LY/T1882的规定执行。

外植体处理

外植体选择

宜选生长健康的花椒当年生嫩枝，取叶柄1.0cm～1.5cm为外植体。

外植体处理

取花椒叶片的叶柄，用清水清洗干净后，先用75%乙醇浸泡1min，再用7.5%次氯酸钠溶液浸泡15min～30min，最后在无菌环境中用无菌水冲洗4～6次。

芽诱导