双特异性抗体与抗体融合蛋白.pptVIP

双特异性抗体

2021/5/271

双特异性抗体概述构建策略应用2021/5/272

概述双特异性抗体：抗体两个结合点表现为不同的特异性，即分别结合不同表位。如，一个结合靶细胞（如肿瘤细胞），另一结合药物或免疫效应细胞（如蓖麻毒素、抗癌药物、细胞毒性细胞）2021/5/273

双特异性抗体2021/5/274

2021/5/275

双特异性抗体的功用：提高疗效，减少副作用。主要用于靶向治疗。2021/5/276

构建策略双特异性抗体的靶标一个结合治疗靶标，另一个指向体内效应细胞T细胞TCRCD3CD22021/5/277

构建策略双特异性抗体的靶标一个结合治疗靶标，另一个指向体内效应细胞吞噬细胞/APCFcγR、CR2021/5/278

构建策略双特异性抗体的靶标一个结合治疗靶标，另一个指向体内效应细胞NK细胞FcγR、CD562021/5/279

双特异性抗体的效应靶效应细胞靶分子效应T细胞TCR/CD3,CD2杀伤肿瘤细胞NK细胞FcγRIII,CD44,CD56,CD38杀伤肿瘤细胞病毒感染细胞中性粒细胞FcγRI,CR3,FcαRI杀伤肿瘤细胞病毒感染细胞单核巨噬细胞FcγRI,CR3,FcαRI杀伤肿瘤细胞病毒感染细胞树突状细胞FcγR抗原递呈红细胞CR1免疫粘附2021/5/2710

构建策略双特异性抗体的构建方法杂化杂交瘤技术将具有某种特异性（如抗瘤细胞）的McAb细胞株与具有抗第二抗原（如蓖麻毒蛋白）的小鼠脾细胞进行融合，即产生出杂化杂交瘤细胞株的二价瘤体。2021/5/2711

杂化杂交瘤技术产生的双特异性抗体2021/5/2712

杂化杂交瘤分泌的抗体形式保持原特异性抗体分子：L1H1-H1L1，L2H2-H2L2重链特异性相同的配对抗体分子：L1H1-H1L2，L1H2-H2L1L2H1-H1L2，L1H2-H2L2重链、轻链特异性不同的配对抗体分子：L1H1-H2L2，L1H2-H1L2L1H1-H2L1，L2H2-H1L22021/5/2713

只有L1H1-H2L2才是所需的双特异性抗体2021/5/2714

杂化杂交瘤方法的不足产量低，仅占10%产物需筛选，费时费力瘤株不稳定2021/5/2715

构建策略双特异性抗体的构建方法化学交联法Nisonoff和Rivers最早开始研究化学交联无需经过细胞融合，比较简便易行。通常利用重链与轻链这间的二硫链经还原和再氧化，将两种不同特异性抗体的半分子结合在一起。或用双功能交联剂，如邻苯酸酯等，把两个抗体半分子交联在一起。2021/5/2716

化学交联的双特异性抗体2021/5/2717

构建策略双特异性抗体的构建方法化学交联法用于制备双功能抗体的McAb可以是完整分子，也可是经胃酶水解获得F（abˊ）2片段。后者在减少鼠源免疫原性方面，效果较好。2021/5/2718

构建策略双特异性抗体的构建方法基因工程技术利用分子生物学技术设计产生双功能抗体常见有四种构建形式，多为小分子抗体。2021/5/2719

末端半胱氨酸残基（Cys）共价交联在两种scFv分子C末端分别带上自由的Cys，通过常规二硫键共价交联，形成双特异性抗体VLAVHALCysVLBVHBLCys-S-S-2021/5/2720

单链双特异性抗体将两种scFv分子基因用linker连接在一起，然后表达形成双特异性抗体VLAVHALVLBVHBLL2021/5/2721

微型双特异性抗体利用专门二聚化结构将两种scFv分子连接在一起，形成双特异性抗体如利用fos和jun基因的亮氨酸拉链序列：VLAVHALfosVLBVHBLjun2021/5/2722

双体型双特异性抗体将两种不同抗体的VH和VL用较短的linker连接形成两种不同单链，当它们共表达时，其相互间连接在一起，形成双特异性抗体1993，Holliger2021/5/2723

双特异性抗体的应用免疫诊断肿瘤放射显影肿瘤药物杀伤肿瘤的免疫杀伤乳腺癌、淋巴母细胞白血病、神经胶质瘤2021/5/2724

抗体免疫偶联物2021/5/2725

抗体免疫偶联物概述小分子药物与抗体偶联物毒素及大分子多肽药物与抗体偶联物应用2021/5/2726

概述抗体免疫偶联物将单抗与“弹头”药物偶联在一起，以提高药物作用的特异性，主要用于肿瘤治疗。如，Mylotarg—抗CD33单抗偶联加里奇霉素，治疗老年人急性髓细胞性白血病，2000年上