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《中国肿瘤整合诊治技术指南(caca)-液体活检》

液体活检作为肿瘤精准诊疗领域的重要技术突破，通过分析血液、尿液、脑脊液等体液中的肿瘤相关标志物，实现了对肿瘤的非侵入性检测与动态监测。近年来，随着高通量测序、纳米技术及生物信息学的快速发展，液体活检在肿瘤早筛、疗效评估、耐药监测及预后判断等方面的应用价值日益凸显。中国抗癌协会（CACA）基于国内外最新研究进展，结合中国人群肿瘤流行病学特征与临床实践需求，组织多学科专家制定了《中国肿瘤整合诊治技术指南（CACA）-液体活检》（以下简称“指南”），旨在规范液体活检技术的临床应用，推动肿瘤精准诊疗水平的提升。

一、液体活检的核心技术与生物学基础

液体活检的核心标志物包括循环肿瘤DNA（ctDNA）、循环肿瘤细胞（CTC）、细胞外囊泡（如外泌体）、循环RNA（包括mRNA、miRNA等）及肿瘤相关蛋白等。不同标志物具有独特的生物学特性与临床应用场景，指南针对各类标志物的检测技术与临床价值进行了系统阐述。

ctDNA是肿瘤细胞凋亡或坏死时释放到外周血中的片段化DNA，携带肿瘤特有的体细胞突变、拷贝数变异、甲基化异常等分子特征。其半衰期短（约2小时），可实时反映肿瘤负荷变化，适用于动态监测。研究显示，晚期肿瘤患者血浆ctDNA阳性率可达70%-90%，而早期肿瘤（如Ⅰ期肺癌）阳性率约为10%-40%，提示其在早筛中的应用需结合多靶点检测或与其他标志物联合。

CTC是从原发灶或转移灶脱落进入血液循环的肿瘤细胞，具有完整的形态与功能特征，可用于肿瘤异质性分析及转移机制研究。CTC的捕获与鉴定依赖于表面标志物（如EpCAM）或物理特性（如大小、密度），但由于其数量极少（每毫升血液中仅含1-10个），检测灵敏度受技术限制较大。目前，CTC计数已被用于乳腺癌、前列腺癌等实体瘤的预后评估，其数量变化可提示治疗反应。

外泌体是由细胞分泌的直径30-150nm的膜性囊泡，可携带肿瘤来源的蛋白质、核酸及脂质成分。外泌体的膜结构使其内容物不易被核酸酶降解，稳定性优于游离ctDNA，在脑脊液、尿液等体液中具有独特检测优势。例如，胶质母细胞瘤患者脑脊液中外泌体携带的EGFRvⅢ突变可作为靶向治疗的生物标志物。

二、临床应用场景与规范建议

指南围绕肿瘤全程管理，明确了液体活检在不同阶段的应用价值与操作规范。

（一）肿瘤早期筛查

中国是癌症高发国家，国家癌症中心2022年数据显示，我国每年新发癌症病例约406万，其中57%的患者确诊时已处于中晚期，5年生存率显著低于早期患者。液体活检为高危人群早筛提供了新路径。指南推荐，针对肺癌、肝癌、结直肠癌等高发癌种，可基于多组学液体活检技术（如ctDNA甲基化联合蛋白标志物）进行风险分层。例如，肝癌高风险人群（乙肝病毒携带者、肝硬化患者）可通过检测血浆cfDNA中TP53、CTNNB1等基因的甲基化异常，联合甲胎蛋白（AFP）检测，将早期肝癌检出率提升至85%以上。需注意的是，早筛需严格控制假阳性率（建议＜1%），避免过度诊疗，同时需结合影像学检查进行阳性结果验证。

（二）治疗前分子分型与靶向治疗指导

精准靶向治疗依赖于肿瘤驱动基因的准确检测。传统组织活检存在取样局限性（如肿瘤异质性）、难以重复获取等问题，液体活检可作为补充手段。指南指出，对于无法获取组织样本或样本量不足的患者（如晚期肺癌脑转移），液体活检检测ctDNA中的驱动基因（如EGFR、ALK、ROS1）突变具有临床等效性。但需注意，不同检测平台的灵敏度差异可能导致假阴性，建议采用基于捕获测序的超深度检测（测序深度＞10000×），将检测下限（LOD）控制在0.1%以下。此外，对于MET扩增、HER2扩增等拷贝数变异，需结合数字PCR或荧光原位杂交（FISH）验证，避免因ctDNA片段化导致的检测误差。

（三）疗效监测与耐药机制分析

动态监测治疗过程中ctDNA或CTC的变化，可早期预测疗效并识别耐药。指南建议，在靶向治疗或免疫治疗开始后4-8周进行首次液体活检检测，若ctDNA清除（即未检测到基线突变）提示疗效良好；若ctDNA持续存在或丰度上升，需警惕耐药或疾病进展。例如，EGFR突变阳性肺癌患者接受奥希替尼治疗时，约50%的耐药与MET扩增或EGFRC797S突变相关，通过动态检测ctDNA可提前2-3个月发现耐药突变，指导后续治疗方案调整（如联合MET抑制剂）。对于免疫治疗，循环肿瘤突变负荷（ctTMB）与PD-L1表达的联合检测可更准确预测疗效，弥补组织TMB检测的时效性不足。

（四）术后微小残留病灶（MRD）监测

术后MRD检测是评估肿瘤复发风险的关键手段。指南推荐，对于根治性手术后的患者（如Ⅱ-Ⅲ期结直肠癌、Ⅰ-Ⅱ期肺癌），应在术后4周及3、