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2025年检验中心面试题库及答案

一、专业知识与技术能力

1.问题：简述流式细胞术在急性白血病免疫分型中的应用原理及关键检测指标。

答案：流式细胞术通过荧光标记的单克隆抗体与细胞表面或胞内抗原结合，利用激光激发荧光信号，结合细胞大小（前向散射光）和颗粒度（侧向散射光）参数，对细胞进行多参数分析。在急性白血病免疫分型中，核心是通过检测白血病细胞的分化抗原（如CD系列）确定其来源（髓系或淋系）及分化阶段。关键指标包括：髓系标志（CD13、CD33、CD117、MPO）、B淋系标志（CD19、CD22、CD79a、cCD22）、T淋系标志（CD3、CD7、CD5），以及跨系标志（如CD34、HLA-DR提示原始细胞）。需注意排除正常残留细胞干扰，结合FAB分型和分子遗传学结果综合判断。

2.问题：解释CRP（C反应蛋白）与PCT（降钙素原）在感染诊断中的差异，并举出3种需联合检测的临床场景。

答案：CRP是急性时相蛋白，由肝脏合成，细菌、病毒感染及非感染性炎症均可升高（6-8小时开始上升，峰值24-48小时），但特异性低；PCT是降钙素前体，细菌感染时由甲状腺C细胞和其他组织细胞分泌（2-3小时开始上升，峰值24-48小时），病毒或非感染性炎症时水平极低（通常＜0.5ng/mL），对细菌感染特异性更高。联合检测场景包括：①发热待查（鉴别细菌/病毒感染）；②脓毒症早期（PCT＞2ng/mL提示严重细菌感染）；③抗生素疗效评估（PCT下降＞50%提示有效）；④术后感染监测（排除非感染性CRP升高）。

3.问题：分子诊断实验室中，如何避免PCR检测的交叉污染？请列举5项关键措施。

答案：PCR污染主要来源为扩增产物（DNA/RNA片段）、样本间交叉及环境残留。关键防控措施：①分区操作（试剂准备区→样本处理区→扩增区→产物分析区，单向流动）；②使用带滤芯枪头，避免气溶胶污染；③每次实验后用10%次氯酸钠或紫外线（254nm，30分钟）消毒工作台及移液器；④设立阴性对照（无模板对照、提取对照）监测污染；⑤定期更换实验服、手套，避免不同区域物品混用；⑥扩增后产物严格密封，不在前区开盖；⑦使用UNG酶（尿嘧啶糖基化酶）降解含dUTP的旧扩增产物（仅适用于荧光定量PCR）。

二、操作规范与质量控制

4.问题：全自动生化分析仪进行新项目（如胱抑素C）检测前，需完成哪些验证步骤？请详细说明。

答案：新项目验证需符合《临床实验室质量控制要求》（WS/T640-2018），步骤如下：

①精密度验证：连续5天检测高、中、低值质控品（每天2次），计算批内CV（应≤1/4CLIA’88允许误差）和总CV（≤1/3允许误差）；

②正确度验证：使用定值参考物质（如ERM-DA471/IFCC）检测，偏差应≤1/2允许误差；

③线性范围验证：用系列稀释样本（至少5个浓度点）检测，相关系数r≥0.990，偏离线性≤10%；

④可报告范围验证：确认仪器能准确检测的最高/最低浓度（如超过线性范围需稀释后重测）；

⑤干扰实验：评估常见干扰物（如溶血、脂血、黄疸）对结果的影响（干扰值应≤允许误差）；

⑥参考区间验证：用20例以上健康人群样本检测，95%结果应落在厂家声明区间内（若不符需建立本实验室参考区间）；

⑦临床可接受性验证：与已确认的方法（如免疫比浊法）进行比对，100例样本的偏倚应≤允许误差。

5.问题：某批次凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）室内质控结果显示，PT的均值较靶值偏高15%，其他项目正常。请分析可能原因及处理流程。

答案：可能原因：①试剂因素（PT试剂批号更换未重新校准、试剂复溶不当、保存温度异常）；②仪器因素（加样针堵塞导致样本/试剂加样量不准、光学系统污染影响吸光度检测）；③校准因素（校准品过期或复溶后保存不当、校准过程操作失误）；④样本因素（质控品复溶时体积误差、溶血/脂血干扰）。

处理流程：①复查质控品复溶记录（体积、时间、温度），确认无误后重新检测1次；②检查试剂状态（批号、有效期、保存条件），更换新批号试剂后重测；③校准仪器加样系统（用蒸馏水测加样量准确性），清洁比色杯及光路；④若仍失控，使用另一品牌校准品重新校准PT项目；⑤记录失控原因及处理过程，若4小时内未解决需启动紧急预案（如外送检测或使用手工法检测）；⑥回顾前3个月PT质控数据，若趋势性偏移需分析环境（如温湿度）或人员操作变化。

三、应急处理与风险防控

6.问题：新冠病毒核酸检测中，某样本扩增曲线出现“拖尾”（非特异性扩增），如何排查原因并纠正？

答案：拖尾常见原因为引物二聚体、模板浓度过高、Mg2+浓度过高或扩增条件不当。