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caty48卡秋免疫组化仪操作规程
1总则
1.1目的
为规范caty48卡秋免疫组化仪(以下简称“免疫组化仪”)的操作行为,保障仪器正常稳定运行,确保免疫组化检测结果准确可靠,保护操作人员安全,依据仪器说明书及《实验室生物安全通用要求》《免疫组化检测技术规范》等相关标准,制定本规程。
1.2适用范围
本规程适用于caty48卡秋免疫组化仪的日常操作、样本检测、仪器维护保养及故障处理等相关活动。本仪器专用于生猪屠宰场肉品品质检验中组织切片的免疫组化染色处理,包括抗原修复、抗体孵育、显色反应等自动化流程操作,操作人员、设备维护人员及实验室管理人员均需严格遵守。
1.3核心原则
操作需遵循“专人负责、规范操作、先检查后使用、全程质控”的原则,严格按照仪器操作流程及实验方案执行,严禁违规操作、擅自修改参数,确保检测过程可控、结果准确、仪器完好。
2操作前准备
2.1人员准备
操作人员需经专业培训,熟悉免疫组化仪的结构、工作原理、操作流程及安全注意事项,考核合格后方可上岗。操作前需穿戴好个人防护装备,包括实验服、一次性手套、防护口罩,必要时佩戴防护眼镜,避免直接接触试剂和样本。
2.2环境准备
检查实验室环境,确保温度控制在18℃-25℃,相对湿度40%-60%,无粉尘、振动、电磁干扰及腐蚀性气体。实验台面清洁干燥,仪器放置平稳,周围无障碍物,通风设施运行正常。
2.3仪器检查
开机前对仪器进行全面检查,确保各部件完好、连接正常:
外观检查:仪器外壳无破损、变形,操作面板按键清晰、灵敏,显示屏无划痕、显示正常;
部件连接:检查试剂针、样本架、孵育模块、清洗模块等部件连接牢固,无松动、移位;确认电源线、数据线连接稳定,接口无松动;
耗材检查:检查试剂瓶、废液桶、清洗液容器等安装到位,废液桶无满溢,清洗液、蒸馏水储量充足;
功能预查:打开仪器电源,启动操作系统,检查仪器自检程序正常,无报错提示,各模块运行顺畅。
2.4试剂与样本准备
试剂准备:根据检测需求,准备好对应的一抗、二抗、酶标记物、显色剂、抗原修复液、封闭液、洗涤液等试剂。所有试剂需在有效期内,按要求储存(如冷藏试剂需提前平衡至室温,避免温差影响检测效果)。试剂使用前摇匀,确认无浑浊、沉淀,按仪器要求分装至专用试剂瓶,贴好清晰标签;
样本准备:待检测的组织切片需经前期处理(包括固定、包埋、切片、脱蜡水化等步骤),确保切片完整、无褶皱、附着牢固。切片处理符合《免疫组化检测技术规范》要求,避免样本污染或抗原流失。
3操作流程
3.1仪器开机与参数设置
按仪器说明书要求开启电源,启动caty48卡秋免疫组化仪操作系统,等待仪器完成自检(自检通过后显示屏显示“就绪”状态)。根据检测方案及试剂说明书,在操作系统中设置相关参数:
基本参数:输入样本编号、检测项目、操作人员等信息;
孵育参数:设置一抗孵育温度(通常37℃或4℃)、孵育时间,二抗孵育温度及时间,封闭液孵育温度(一般37℃)及时间(通常30分钟);
抗原修复参数:选择修复方式(微波修复、水浴修复等),设置修复温度(如92℃-95℃)、修复时间(通常40分钟),修复液类型(如pH6.0柠檬酸钠缓冲液);
清洗参数:设置清洗次数(通常3-5次)、每次清洗时间(3-5分钟),选择洗涤液类型(PBS或TBS缓冲液);
显色参数:设置显色剂孵育时间(根据试剂要求调整,通常3-10分钟),确保显色反应充分且无过度显色。
参数设置完成后,仔细核对,确认无误后保存方案并提交。
3.2样本与试剂装载
将处理好的组织切片小心放入仪器样本架,确保切片位置准确、固定牢固,避免运行过程中脱落。按仪器提示将准备好的各试剂瓶对应放入试剂仓,确保试剂瓶与仪器接口密封良好,试剂针能准确吸取试剂。检查废液桶及清洗液容器连接正常,确保废液顺畅排出、清洗液供应稳定。
3.3启动检测程序
再次核对样本信息、试剂类型及参数设置,确认无误后,在操作系统中点击“启动”按钮,启动免疫组化检测程序。仪器自动开始按预设流程运行,包括抗原修复、内源性过氧化物酶灭活(加入3%过氧化氢水溶液,室温孵育10分钟)、封闭、一抗孵育、清洗、二抗孵育、清洗、显色、终止反应、清洗脱水等步骤。
检测过程中,操作人员需在现场全程监护,密切观察仪器运行状态,通过显示屏实时查看各步骤进度,注意有无试剂泄漏、仪器异响、报错提示等异常情况。若出现异常,立即点击“暂停”按钮,按故障处理流程处理。
3.4程序结束与样本取出
仪器完成全部检测流程后,会发出提示音,显示屏显示“程序完成”。操作人员点击“确认”后,等待仪器运行停止,打开仪器舱门,小心取出样本架及剩余试剂瓶。取出组织切片时,动作轻柔,避免切片破损,将切片放置在专用托盘内,做好标识。
3.5后续处理
将取出的组织切片按要求进行
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