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固相萃取技术在医药分析中的应用

一、固相萃取概述

1、固相萃取定义

固相萃取（SPE）是近年来快速开发的样品制备方法。固相萃取技术使用固体吸附剂吸附液体样品中的目标化合物，将其与基质和样品的干扰化合物分离，然后使用洗脱液热量的洗脱或解吸达到分离和富集目标化合物的目的，大大提高了分析物特别是痕量分析物的检测能力，提高了待测样品的回收率。固相萃取是涉及液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取中，固体分离比溶解和分离的溶剂具有更大的吸附容量。当样品溶液通过吸附床时，分离物浓缩在其表面上，其它样品组分通过吸附床;通过吸附吸附物而不吸附其他样品组分获得高纯度和浓缩的分离物。它极大地弥补了液液萃取方法的缺陷，具有省时，溶剂用量少，乳化不容易，通用性好等优点，可以满足样品制备自动化的要求。

2、固相萃取的原理

固相萃取的基本原理是样品在两相之间的分配，即在固相（吸附剂）和液相（溶剂）之间的分配。其保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子间作用力。洗脱模式有两种：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化台物亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强，则目标化台物被直接洗脱。通常采用前一种洗脱模式。

3、固相萃取的特点

固相萃取采用自动化可以大大节省人力和时间；另外，固相萃取自动化可以减少人为因素造成的误差，从而提高结果的可靠性。一套成熟的自动固相萃取仪应该满足自动化、模块化、经济化、平行化、功能化、扩展化、可靠化这几个特点。=1\*GB3①自动化：一套完善的自动化固相萃取系统可以真正在无人值守的情况下完成固相萃取方法的应用。=2\*GB3②模块化：可以根据不同用户的应用切换不用的模块，完成不同固相萃取方法的应用，如双柱叠加。=3\*GB3③经济化：一套成熟的全自动固相萃取仪应该给客户提供经济化的后期使用体验。包括试剂、耗材如SPE小柱的选择。应该可以兼容市售的主流SPE小柱供应商的产品。=4\*GB3④平行化：使用自动化固相萃取系统的客户往往希望能够平行处理，也就是同时处理多个样品，这种对平行化的要求可以体现在固相萃取的每个步骤，包括小柱活化、上样、清洗、洗脱。=5\*GB3⑤功能化：越来越多的实验室会针对各类样品进行前处理，包括食品、药品、农业、环境等相关领域。客户希望能够在同一平台完成常规样品和大体积样品的处理。=6\*GB3⑥扩展化：扩展性是从软件和硬件上。从软件上，拥有一个比较开放、自由的控制软件能够给客户的应用方案提供更多的可行性。从硬件上，实验室拥有品目繁多的各类实验用试管及容器，一套成熟的自动固相萃取仪应该能够给用户自动自定义管架的功能。=7\*GB3⑦可靠化：自动化的仪器最重要的特质就是稳定、可靠。这样才能发挥自动化的优势，将实验中的人为误差降至最低。而软件则是其中的重要一环，主流厂商如美国吉尔森公司的产品运用数据库底核架构的软件来控制仪器的运行，不但使得软件更加稳定，而且方便客户随时调阅以往实验的数据记录。有些厂家往往把各类功能集合在一起，这样反而由于功能模块的过多使得故障率偏高，往往一个模块如浓缩的问题导致整套系统瘫痪，十分影响到客户的正常应用。

二、固相萃取技术在医药分析中的应用

20世纪80年代以来，随着硅胶键合相等新型固相吸附剂的不断开发，固相萃取技术有了迅速的发展。固相萃取技术凭借溶剂用量少、操作简单、选择性高、重现性好的优势，已发展成为分离和浓缩各种样品中痕量分析物质的一种强有力的工具，广泛应用于药物分析、毒物分析、环境检测等方面。

1、化学药检测

Clidy等人使用新的96孔固相萃取盘测定苯二氮卓类药物（去甲安定、安定、去甲羟基安定以及氯羟去甲安定），无需使用真空泵和LC-MS/MS装置。固相萃取盘是十八烷基键合的硅胶，其中使用硅胶作为吸附剂，并且96孔板的粒径为12μm。液相色谱条件为Shimadzu（LC-10，AD）液相色谱仪，体积流量为0.5mL/min，流动相A为乙腈-水（10:90，含有0.1％乙酸），流动相B.乙腈-水（90:10，含0.1％乙酸），梯度洗脱程序：0-5分钟，100％A-100％B，进样体积20μL。使用机器自动进样器将提取物在96孔固相萃取盘中平行进行。三种提取底物是磷酸盐缓冲液，尿液和血浆。使用96孔固相萃取盘，样品预处理时间为0.94分钟。三种基质的可重现RSD值不超过9％。所有基质的检测限和定量限分别为0.02至0.15和0.2至2.0ng/mL，线性范围为0.2至500ng/mL。固相萃取盘可以重复使用，降低了样品预处理的成本。与传统的SPE方法相比