CN114096671A 用于在异源系统中生物合成类萜或大麻素的组合物和方法 （因美制药公司）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(43)申请公

(10)申请公布号CN114096671A布日2022.02.25

(21)申请号202080034007.9

(22)申请日2020.03.06

(30)优先权数据

62/8148162019.03.06US

62/8148232019.03.06US

(85)PCT国际申请进入国家阶段日

2021.11.05

(86)PCT国际申请的申请数据

PCT/CA2020/0503092020.03.06

(87)PCT国际申请的公布数据

WO2020/176998EN2020.09.10

(71)申请人因美制药公司

地址加拿大不列颠哥伦比亚省

(72)发明人V·G·亚达夫P·罗伊

S·阿亚卡B·常E·徐

(74)专利代理机构中国专利代理(香港)有限公

司72001代理人李志强梅黎

(51)Int.CI.

C12N15/63(2006.01)

C12N1/21(2006.01)

C12N15/31(2006.01)

C12N15/52(2006.01)

C12N15/54(2006.01)

C12P1/00(2006.01)

C12P17/02(2006.01)

C12P7/00(2006.01)

权利要求书3页说明书51页附图26页

(54)发明名称

聚酮途径聚酮形成西基雷锁辛酸异戊二烯化

聚酮途径

聚酮形成

西基雷锁辛酸

异戊二烯化

次大麻招龄酸(CBGVA)

合

CDCVA

nICA

非酶促脱族

CHDCBCTHicyCBDV

聚途径

橄视酵酸

CBCACBDA

芳族异戊二烯基转移龄

大麻基龄酸

类稿建径

CBDVA

TICVA

合酶

(57)摘要

保建径CN

保建径

CN114066671A

CN114096671A权利要求书1/3页

2

1.一种宿主细胞，其包含：

a.表达盒，所述表达盒包含可操作地连接至编码异源转运蛋白或其功能片段的异源核酸的启动子，其中所述转运蛋白选自由主要协助转运蛋白超家族(MFS)芳族酸反向转运蛋白和OprD家族孔蛋白组成的组；和

b.芳族底物，所述芳族底物选自橄榄醇酸、丙基雷锁辛酸(DVA)或其代谢物、衍生物或脱羧产物，

其中与缺乏a)的表达盒的对照宿主细胞相比，所述宿主细胞能够增加所述芳族底物向所述宿主细胞的输入。

2.如权利要求1所述的宿主细胞，其中所述细胞是原核生物，优选地其中所述原核生物选自由埃希氏菌属、泛菌属、芽孢杆菌属、棒状杆菌属或乳球菌属的原核生物组成的组。

3.如权利要求1所述的宿主细胞，其中所述细胞是大肠埃希杆菌(大肠杆菌)、柠檬泛菌、谷氨酸棒状杆菌、枯草芽孢杆菌或乳酸乳球菌。

4.如权利要求1所述的宿主细胞，其中所述细胞是大肠埃希杆菌(大肠杆菌)。

5.如权利要求1-4中任一项所述的宿主细胞，其中所述转运蛋白是MFS芳族酸反向转运蛋白pcaK或其功能片段；或其中所述转运蛋白是OprD家族孔蛋白pp3656或其功能片段。

6.如权利要求1-5中任一项所述的宿主细胞，其中所述转运蛋白与以下列出的序列的100个连续氨基酸至少50%或55%同一或与以下列出的序列的100个连续氨基酸同一：SEQIDNO.6、7、8或9。

7.如权利要求1-6中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞还包含异源芳族异戊二烯基转移酶或其功能片段，其中所述芳族异戊二烯基转移酶是功能性的且能够使所述芳族酸底物异戊二烯化。

8.如权利要求7所述的宿主细胞，其中所述异源芳族异戊二烯基转移酶是CBGAS或NphB或其功能片段。

9.如权利要求8所述的宿主细胞，其中所述异源芳族异戊二烯基转移酶是CBGAS的功能片段。

10.如权利要求9所述的宿主细胞，其中所述CBGAS的功能片段与以下列出的序列的100个连续氨基酸至少50%或55%同一或与以下列出的序列的100个连续氨基酸同一：SEQID

NO.3。

11.如权利要求1-10中任一项所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞包含表达盒，所述表达盒包含可操作地连接至编码一种或多种MEP途径酶的核酸的启动子，所述MEP途径酶选自由