CN113584089A 异戊烯基转移酶催化合成大麻萜酚或大麻萜酚酸的用途 （嘉兴欣贝莱生物科技有限公司）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN113584089A

(43)申请公布日2021.11.02

(21)申请号202110749746.2

(22)申请日2021.07.01

(71)申请人嘉兴欣贝莱生物科技有限公司

地址314001浙江省嘉兴市南湖区昌盛南

路501号浙江欧美生物科技产业园2幢3层101室

(72)发明人陈贤情杨月夏文豪李珍珠王筱逯晓云刘诗梦江会锋王文

(74)专利代理机构中科专利商标代理有限责任公司11021

代理人高丽娜张莹

(51)Int.CI.

C12P7/22(2006.01)

C12P7/42(2006.01)

C12N9/10(2006.01)

权利要求书1页说明书8页序列表8页附图5页

(54)发明名称

异戊烯基转移酶催化合成大麻萜酚或大麻萜酚酸的用途

(57)摘要

CN113584089A本发明提供了异戊烯基转移酶在催化合成植物大麻素或其类似物中的用途，其中所述异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.1-8任一所示的氨基酸序列。本发明还提供了植物大麻素或其类似物的制备方法，其使用异戊烯基转移酶对底物进行催化反应；其中，所述异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.1-8任一所示的氨基酸序列，所述植物大麻素或其类似物为CBG或CBGA。本发明筛选获得的NPHB可用于高效合成CBG和

CN113584089A

CN113584089A权利要求书1/1页

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1.异戊烯基转移酶在催化合成植物大麻素或其类似物中的用途，其中所述异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.1-8任一所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述植物大麻素或其类似物为大麻萜酚CBG或大麻萜酚酸CBGA。

3.根据权利要求2所述的用途，当植物大麻素或其类似物为CBG时，所使用的异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.1-5任一所示的氨基酸序列；当植物大麻素或其类似物为CBGA时，所使用的异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.6-8任一所示的氨基酸序列；

任选地，所述异戊烯基转移酶可以是人工合成的或者经由原核生物(例如大肠杆菌)表达获得的；

任选地，所述异戊烯基转移酶可经由体外催化、胞内催化或酶固定化反应催化合成植物大麻素或其类似物。

4.根据权利要求2所述的用途，当植物大麻素或其类似物为CBG时，所使用的底物为橄榄醇和GPP;当植物大麻素或其类似物为CBGA时，所使用的底物为2,4-二羟基-6-戊基苯甲酸和GPP。

5.植物大麻素或其类似物的制备方法，其特征在于，使用异戊烯基转移酶对底物进行催化反应，其中，所述异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.1-8任一所示的氨基酸序列；

优选地，所述植物大麻素或其类似物为CBG或CBGA。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其中当植物大麻素或其类似物为CBG时，所使用的异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.1-5任一所示的氨基酸序列；当植物大麻素或其类似物为CBGA时，所使用的异戊烯基转移酶具有SEQIDNO.6-8任一所示的氨基酸序列。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其中，所述异戊烯基转移酶还包括信号肽；任选地，所述信号肽包括但不限于用于纯化、定位、助溶功能的信号肽。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其中，在催化反应中，异戊烯基转移酶的量为0.2-8ng/uL(优选0.5-8ng/uL,更优选1-3ng/uL)。

9.根据权利要求5所述的制备方法，其中，催化反应中的pH为6-10,优选7-9。

10.根据权利要求5所述的制备方法，其中，在催化反应中，反应温度为18-60℃(优选18-40℃,更优选20-30℃),反应时间为4-24h(优选8-16h)。

11.根据权利要求5所述的制备方法，其中当植物大麻素或其类似物为CBG时，所使用底物为橄榄醇和GPP,其中橄榄醇终浓度为1-10mM,优选5-7mM;GPP的终浓度为0.5-8mM,优选

1-5mM。

12.根据权利要求5所述的制备方法，当植物大麻素或其类似物为CBGA时，所使用的底物为2,4-二羟基-6-戊基苯甲酸和GPP,其中2,4-二羟基-6-戊基苯甲酸终浓度为1-10mM,优选5-7mM;GPP的终浓度为0.5-8mM,优选1-5mM。

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