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林木多基因叠加载体组装试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.多基因叠加载体组装常用的工具酶是（）

A.淀粉酶B.限制性内切酶C.蛋白酶D.脂肪酶

2.下列哪种载体适合林木多基因叠加（）

A.细菌质粒B.噬菌体C.Ti质粒D.人工染色体

3.多基因叠加载体构建中，连接目的基因和载体的是（）

A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.反转录酶D.解旋酶

4.用于筛选含有重组载体细胞的是（）

A.抗性基因B.启动子C.终止子D.增强子

5.多基因叠加的主要目的是（）

A.提高林木生长速度B.赋予林木多种优良性状C.增加林木产量D.改善林木外观

6.构建多基因叠加载体首先要（）

A.提取目的基因B.选择合适载体C.酶切载体D.转化细胞

7.以下不是多基因叠加载体组装的关键步骤的是（）

A.基因克隆B.载体选择C.细胞培养D.连接反应

8.多基因叠加载体组装中，保证基因正确表达的元件是（）

A.复制原点B.调控序列C.标记基因D.多克隆位点

9.能将重组载体导入林木细胞的方法是（）

A.加热法B.电击法C.离心法D.过滤法

10.多基因叠加载体构建成功的标志是（）

A.有重组条带B.细胞能生长C.目的基因正确表达D.载体被酶切

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.多基因叠加载体组装涉及的技术有（）

A.基因克隆技术B.载体构建技术C.细胞转化技术D.蛋白质纯化技术

2.选择用于多基因叠加的载体时需考虑（）

A.载体大小B.复制能力C.多克隆位点D.抗性标记

3.多基因叠加载体组装中常用的连接方法有（）

A.粘性末端连接B.平末端连接C.同聚物加尾连接D.人工接头连接

4.以下属于多基因叠加优势的是（）

A.培育综合优良性状林木B.提高林木抗逆性C.减少育种时间D.降低生产成本

5.构建多基因叠加载体时，目的基因的来源有（）

A.从基因组文库获取B.人工合成C.cDNA文库获取D.从其他生物直接获取

6.多基因叠加载体中调控序列包括（）

A.启动子B.增强子C.终止子D.内含子

7.筛选含有重组载体的细胞方法有（）

A.抗生素筛选B.蓝白斑筛选C.荧光筛选D.密度筛选

8.多基因叠加载体组装可能面临的问题有（）

A.基因沉默B.载体不稳定C.连接效率低D.转化困难

9.常用的将重组载体导入林木细胞的方法有（）

A.农杆菌介导转化B.基因枪法C.花粉管通道法D.显微注射法

10.验证多基因叠加载体构建成功的方法有（）

A.酶切鉴定B.PCR鉴定C.测序鉴定D.表达产物检测

三、判断题（每题2分，共10题）

1.多基因叠加载体组装只能用于林木育种。（）

2.所有载体都适合多基因叠加。（）

3.DNA连接酶能将任意两个DNA片段连接。（）

4.抗性基因在多基因叠加载体中可有可无。（）

5.多基因叠加一定能培育出理想的林木品种。（）

6.提取目的基因不需要特定的方法。（）

7.载体的多克隆位点越多越好。（）

8.多基因叠加载体组装过程中不需要考虑基因表达顺序。（）

9.只要重组载体导入细胞就意味着构建成功。（）

10.不同的林木对载体导入方法的敏感性相同。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述多基因叠加载体组装的基本流程。

答：先提取目的基因，选择合适载体并酶切，再用连接酶将目的基因与载体连接，构建重组载体，然后导入细胞，最后进行筛选和鉴定。

2.多基因叠加载体中调控序列的作用是什么？

答：调控序列如启动子、增强子、终止子等，启动子启动基因转录，增强子增强转录效率，终止子使转录结束，确保目的基因在林木细胞中正确、适量表达。

3.为什么多基因叠加在林木育种中有重要意义？

答：可将多个优良性状基因整合到一个载体，导入林木细胞，使林木同时具备多种优良性状，如抗虫、抗病、速生等，加快育种进程。

4.简述筛选含有重组载体细胞的原理。

答：利用载体上的抗性基因或标记基因。如含抗生素抗性基因，在含相应抗生素培养基上，含重组载体的细胞因有抗性可生长；蓝白斑筛选利用lacZ基因，重组载体使lacZ