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吴茱萸次碱对大鼠心室肌细胞离子通道的影响及机制探究

一、引言

1.1研究背景

心血管疾病严重威胁人类健康，是全球范围内导致死亡和残疾的主要原因之一。随着社会经济的发展、人口老龄化进程的加快以及居民生活方式的变化，心血管病危险因素水平持续增加，心血管病负担日渐加重，已成为重大的公共卫生问题。在中国，城乡居民心血管病患病率呈上升趋势，死亡率居高不下，加强心血管病防治刻不容缓。

吴茱萸（Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.）作为一种传统中药，在临床上应用广泛，始载于《神农本草经》，其性热，味辛苦，有毒，归肝、脾、胃经，有散寒止痛、疏肝下气、燥湿之功。吴茱萸次碱（Rutaecarpine，Rut）是从吴茱萸中提取分离得到的一种吲哚喹唑啉类生物碱，化学结构为8，13-二氢吲哚-[2′，3′：3，4]吡啶并[2，1-b]喹唑啉-5（7H）-酮，是吴茱萸的主要活性成分之一。近年来，吴茱萸次碱在心血管疾病治疗中的潜在价值受到了广泛关注。

研究表明，吴茱萸次碱对心脏具有多种保护作用。它对离体豚鼠右心房具有正性肌力和正性频率的作用，这主要是由于其激活了主要分布在支配心脏和血管的感觉神经中的辣椒素受体（transientreceptorpotentialvanilloid，TRPV1），同时TRPV1的激活诱导降钙素基因相关肽（CGRP）的释放，CGRP作为辣椒素敏感感觉神经中的主要递质，介导了吴茱萸次碱对心脏的兴奋作用。在一些动物心脏病模型中，如大鼠心脏缺血再灌注模型，用吴茱萸次碱预处理后，可显著降低梗死面积和肌酸激酶的释放，同时显著增加血浆中CGRP的浓度，且这种作用能被竞争性辣椒素受体拮抗剂capsazepine、选择性地消耗辣椒素敏感感觉神经中的递质capsaicin和选择性CGRP受体拮抗剂CGRP8-37拮抗。在离体豚鼠心脏中，吴茱萸次碱还能通过增大冠脉流出液中的CGRP水平、降低心肌组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量，达到对心脏过敏反应的保护作用。此外，吴茱萸次碱还能显著抑制大鼠腹主动脉缩窄所致左室肥厚，其机制可能与抑制MAPK/ERK信号通路有关。

在血管方面，吴茱萸次碱也展现出重要作用。在离体大鼠胸主动脉环中，它能剂量依赖性抑制去甲肾上腺素诱导的收缩血管作用，并且增加内皮完整环中的cGMP产生，去除血管内皮则能显著降低其作用。在全细胞膜片钳记录中显示，在大鼠内皮细胞（ECs）中，吴茱萸次碱激活非电压依赖性的Ca2?通道开放；在大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）中，吴茱萸次碱显著抑制L型电压依赖性Ca2?通道。进一步研究发现，吴茱萸次碱能增加培养的ECs中的细胞内Ca2?浓度，降低VSMCs中细胞内Ca2?浓度，以Ca2?浓度依赖的方式增加一氧化氮（NO）释放，内皮依赖性地增加环磷酸鸟苷浓度（cGMP），并且NO合成酶抑制剂（NG-nitro-L-arginine，L-NNA）能显著抑制吴茱萸次碱的降血压作用和扩张血管作用。同时，吴茱萸次碱的降压和血管扩张效果也与刺激辣椒素受体导致CGRP释放有关。

心脏的正常功能依赖于心肌细胞的电生理活动，而离子通道在其中起着关键作用。心肌细胞离子通道包括钠离子通道、钾离子通道、钙离子通道等，它们的正常功能维持着心肌细胞的兴奋性、传导性和收缩性。一旦离子通道功能异常，就可能导致心律失常等心血管疾病的发生。如瞬时外向钾电流（Ito）是心肌细胞动作电位复极1期的主要离子流，其异常与多种心律失常的发生密切相关。研究吴茱萸次碱对大鼠心室肌细胞离子通道的影响，有助于深入了解其在心血管系统中的作用机制，为开发基于吴茱萸次碱的心血管疾病治疗药物提供理论依据，也为心血管疾病的防治提供新的思路和方法。

1.2研究目的和意义

本研究旨在通过全细胞膜片钳技术，深入探究吴茱萸次碱对大鼠心室肌细胞离子通道的具体作用，包括对钠离子通道、钾离子通道、钙离子通道等多种离子通道电流的影响，明确其作用的浓度依赖性、时间依赖性等特性。同时，进一步探讨吴茱萸次碱影响离子通道的分子机制，如是否通过与离子通道蛋白直接结合，或者通过细胞内信号转导通路间接调控离子通道的功能。

从理论层面来看，本研究将丰富吴茱萸次碱在心血管领域的作用机制研究，为中药单体对心肌细胞电生理影响的研究提供新的范例，有助于完善对吴茱萸次碱心血管药理作用的理论体系。心肌细胞离子通道的正常功能是维持心脏正常节律和收缩功能的基础，深入了解吴茱萸次碱对离子通道的作用机制，能够为解释其在心血管疾病治疗中的作用提供关键的理论依据。

在实际应用方面，心血管疾病严重威胁人类健康，目前的治疗手段仍存在一定的局限性