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第十六章肠杆菌科;本科共同特性为:革兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌,共28属、110种。多为正常肠道菌群成员。
沙门氏菌属、志贺菌属、以及埃希菌属和耶尔森菌属的部分成员对人和动物有广泛的致病性,在公共卫生和兽医临有重要意义。
第一节埃希菌属
本属现有5个种,其中最重要的种是大肠埃希菌(E.coli),俗称大肠杆菌,下分血清型。本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。
大肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指标(水、空气);
本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象,原核表达。;一、形态染色特性大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌,大小0.4-0.7um×2-3um,两端钝圆、散在,周身鞭毛可运动,多有菌毛。
二、培养及生化特性本菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,在营养琼脂上,形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,径约2-3mm;
本菌大多可以发酵乳糖产酸产气,麦康凯琼脂上形成红色菌落;在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落;一些致病性菌株在绵羊血平板上呈β溶血。;粪便中大肠杆菌的分离与鉴定;空气中大肠杆菌的分离与鉴定;;1999\12\28002;产肠毒素大肠杆菌(ETEC)ETEC系一类致人和幼畜(初生仔猪黄痢、犊牛、羔羊及断奶仔猪腹泻)腹泻的最常见的病原性大肠杆菌。
其毒力因子主要由黏附素性菌毛和肠毒素两类构成。
初生幼畜被ETEC感染后常因剧烈水样腹泻和迅速脱水死亡,发病率和死亡率均很高。
(1)黏附性菌毛,能黏附于宿主的小肠上皮细胞,故又称其为黏附素或定居因子,对其抗原称作黏附素抗原或定居因子抗原。;毒力岛EHEC具有35kbLEE毒力岛p105
禽致病性大肠杆菌(APEC):引起禽类急性的、系统性疾病的病原性大肠杆杆菌。
表现为:气囊炎、肺炎、心包炎、肝周炎等;(四)大肠杆菌主要毒素基因的检测;;;3.纯培养物抗原鉴定将TSI琼脂反应模式符合埃希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做O、K抗原鉴定。
4.检测毒力因子确定其属于何类致病性大肠杆菌。
六、防治
1.目前已有菌苗,包括抗粘附素的含???价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗或亚单位苗;
2.抗肠毒素的类毒素苗;
3.表达一种或两种粘附素以及同时表达一种粘附素和肠毒素的基因工程菌苗等。用这些菌苗免疫怀孕母畜后,均能使其后代从初乳中获得抗体而被动保护。;4.用多种常见O抗原的鸡大肠杆菌灭活油佐剂菌苗,给各种日龄鸡注射后可获得较好的预防效果,免疫力可达3-5月不等。
5.对猪水肿病预防,用由几种常见O抗原菌株制成的灭活菌苗,小试结果表明,此苗能较显著减少仔猪群中该诉的发病率,保护率约60%-70%。
6.生物学方法微生态制剂。
7.抗菌药物耐药菌株产生,药敏试验。;;;三、抗原及变异沙门氏菌具有O、H、K和菌毛四种抗原。
O和H抗原是其主要抗原,构成沙门氏菌血清型抗原。
O抗原是耐热多糖LPS抗原,100℃2.5h不被破坏。一个菌体可有几种O抗原成分,以数字表示。
将有共同O抗原(群因子)的血清型菌归为一群,以大写英文字母表示A-F。
K抗原是部分沙门氏菌表面包膜抗原,又称为Vi抗原,不耐热,60℃1h破坏。
H抗原是鞭毛抗原,有63种,不耐热,60℃30-60min破坏。H抗原可分为第1相和第2相两种。
;;第16章;;六、毒力因子沙门氏菌毒力因子有多种,主要有脂多糖(LPS)、
肠毒素、细胞毒素及毒力基因等。
七、免疫性体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重
要。认为细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。
八、微生物学诊断
1.未污染病料直接接种普通琼脂、血琼脂或SS鉴别培养基平板分离细菌;
2.污染材料如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏组织等,常需要增菌培养基增菌后再行分离。;3.增菌培养基最常用的有亮绿-胆盐-四硫磺酸钠肉汤、四硫磺酸盐增菌液、亚硒酸盐增菌液以及亮绿-胱氨酸-亚硒酸氢钠增菌液等。这些培养基能抑制其他杂菌生长而有利于沙门氏菌大量繁殖。
4.鉴别培养基麦康凯、伊红美蓝、SS、去氧胆盐钠-枸橼酸盐等琼脂,绝大多数沙门氏菌因不发酵乳糖,故在麦康凯平板上其菌落颜色与大肠杆菌不同,不显红色!可以鉴别。
5.生化试验挑可疑菌落分别接种三糖铁(TSI)琼脂和尿素琼脂等培养,观察其生化特性。
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