2-2核酸及理化性质.pptVIP

第二章生物大分子的性质;核酸是存在于细胞中的一类大分子酸性物质，包括核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）两大类。

RNA和DNA都是以单核苷酸为基本单位所组成的多核苷酸长链。

RNA主要参与遗传信息的表达，而DNA则是遗传信息的载体。;一、核酸的种类与分布

（一）核酸的种类（RNA、DNA）

核糖核酸（ribonucleicacid-RNA）:

转移RNA(transferRNA-tRNA)、信使RNA(messengerRNA-mRNA)、核糖体RNA（ribosomalRNA-rRNA）

小分子细胞核RNA（snRNA）、染色质RNA（chRNA）、反义RNA（antisenseRNA）、双链RNA（dsRNA）、细胞质小RNA（scRNA）、具有催化活性的RNA（ribozyme）、各种病毒RNA。

功能：三者共同参与遗传信息的表达。

;脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid-DNA），是遗传信息的载体，负责遗传信息的贮存和发布。;;二、核酸的生物学功能

;;1952年，美国冷泉港

Hershey-Chase

噬菌体浸染细菌的实验。

;第二节：核酸的化学组成;二核酸的分子组成;NucleotidesLinkedbyPhosphodiesterBond;TheNotationforNucleicAcids;TheTwoChainsofDNAAreAntiparallel;（1）参与DNA、RNA的合成、蛋白质的合成、糖与磷脂的合成。

（2）在能量转化中起重要作用，ATP是生物体内能量的通用货币。

（3）是构成多种辅酶的成分：NAD、NADP、FAD、FMN和CoA。

（4）参与细胞中的代谢与调节（cAMP、cGMP）。;一、核酸的一般物理性质;DNA溶液的粘度很大，而RNA溶液的粘度小得多。核酸发生变性或降解后其粘度降低。

核酸受到强大离心力的作用时，可从溶液中沉降下来，其沉降速度与核酸的大小和密度有关。;二、核酸的两性性质及等电点;由于核酸分子中的磷酸是一个中等强度的酸，而碱基呈现弱碱性，所以核酸的等电点比较低。（当核酸分子内的酸性解离和碱性解离相等，本身所带的正电荷与负电荷相等时，此时核酸溶液的pH值即为核酸的等电点pI）

DNA的等电点为4～4.5，RNA的等电点为2～2.5。核酸在其等电点时溶解度最小。

RNA的等电点比DNA低的原因，是RNA分子中核糖基2′-OH通过氢键促进了磷酸基上质子的解离。DNA没有这种作用。;三、核酸的水解;DNA和RNA对碱的耐受程度有很大差别。

在0.3-1mol/LNaOH溶液中，在室温至370C条件下RNA几乎可以完全水解，生成2′-或3′-磷酸核苷；DNA在同样条件下则不受影响，若加温至1000C，4个小时也可得到小分子的寡聚脱氧核苷酸。这种水解性能上的差别，与RNA核糖基上2′-OH的羟基参与作用有很大的关系。

（在RNA水解时，2′-OH首先进攻磷酸基，在断开磷酯键的同时形成环状磷酸二酯，再在碱的作用形成水解产物。）;2、核酸的酶解;根据作用方式又分作两类：核酸外切酶和核酸内切酶。

核酸外切酶的作用方式是从多聚核苷酸链的一端（3′-端或5′-端）开始，逐个水解切除核苷酸；

核酸内切酶的作用方式刚好和外切酶相反，它从多聚核苷酸链中间开始，在某个位点切断磷酸二酯键。（小球菌核酸酶即可外切又可内切）

在分子生物学研究中最有应用价值的是限制性核酸内切酶。这种酶可以特异性的水解核酸中某些特定碱基顺序部位。;四、核酸的紫外吸收;五．核酸的变性、复性与杂交;1、DNA的变性;▲实质破坏DNA的空间结构

;DNA变性后的性质改变：

①增色效应：指DNA变性后对260nm紫外光的光吸收度增加的现象；

②旋光性下降；

③粘度降低；

浮力密度增大；

分子量不变；

④生物学功能丧失或改变。;2.RNA变性

RNA本身只有局部的双螺旋区，所以变性行为所引起的性质变化没有DNA那样明显。

利用紫外吸收的变化，可以检测核酸变性的情况。

因为天然状态的DNA在完全变性后，紫外吸收(260nm)值增加25－40%.而RNA变性后，约增加1.1%。;3.DNA的热变性和解链温度（Tm）;DNA的变性温度：加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的变性温度（融解温度，Tm）。;Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，G+C的含量越高，则Tm越高。;G和C的含量高，Tm值高。因而测定Tm值，可反映D