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生物制药层析介质研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

生物制药层析介质研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

一、填空题（共10题，每题1分，共10分）

1.用于单抗纯化的核心亲和介质是______。

2.阴离子交换介质DEAE的全称为______。

3.琼脂糖层析介质的常用交联剂是______。

4.疏水相互作用层析的洗脱原理是______。

5.单位体积介质结合目标蛋白的量称为______。

6.生物制药层析需遵循的核心法规是______。

7.金属螯合层析常用的螯合金属离子是______（举1例）。

8.硅胶介质适合分离______（小分子/大分子蛋白）。

9.层析柱装填的核心要求是______。

10.层析介质保存需避免______（导致结构破坏）。

答案

1.ProteinA亲和介质

2.二乙氨基乙基

3.环氧氯丙烷

4.降低缓冲液盐浓度

5.动态载量

6.GMP（药品生产质量管理规范）

7.Ni2?（或Co2?等）

8.小分子

9.介质分布均匀（无气泡、断层）

10.冻融

二、单项选择题（共10题，每题2分，共20分）

1.特异性结合单抗Fc段的介质是？

A.DEAE纤维素B.ProteinA琼脂糖C.硅胶D.疏水介质

2.DEAE属于哪类离子交换介质？

A.强阴离子B.弱阴离子C.强阳离子D.弱阳离子

3.琼脂糖介质的缺点是？

A.亲水性差B.耐强酸强碱C.孔径固定D.生物相容性低

4.疏水层析上样时缓冲液盐浓度应？

A.高B.低C.无要求D.与洗脱液相同

5.亲和层析的特异性取决于？

A.载体材料B.配基类型C.缓冲液pHD.流速

6.耐碱性能较好的介质是？

A.交联琼脂糖B.硅胶C.葡聚糖D.纤维素

7.柱压过高的常见原因不包括？

A.粒径过小B.流速过快C.柱床塌陷D.盐浓度低

8.重组蛋白精纯常用的层析技术是？

A.离子交换B.亲和C.疏水D.以上都有

9.GMP要求层析介质需具备？

A.可追溯性B.一次性使用C.无动物源成分D.高价格

10.组氨酸标签蛋白与哪种金属结合最强？

A.Ni2?B.Co2?C.Cu2?D.Zn2?

答案

1-5:BBCAB；6-10:ADDAA

三、多项选择题（共10题，每题2分，共20分）

1.层析载体材料包括？

A.琼脂糖B.葡聚糖C.纤维素D.硅胶

2.离子交换介质类型有？

A.阴离子（DEAE、Q）B.阳离子（CM、SP）C.混合模式D.疏水

3.亲和配基类型包括？

A.ProteinAB.染料配基C.金属螯合D.离子交换基团

4.层析介质关键指标包括？

A.动态载量B.粒径分布C.孔径D.耐化学性

5.生物制药层析步骤有？

A.捕获B.中间纯化C.精纯D.脱盐

6.硅胶介质的缺点是？

A.不耐碱B.孔径固定C.亲水性差D.载量低

7.琼脂糖介质的优点是？

A.亲水性好B.生物相容性高C.孔径可调D.耐多种试剂

8.层析需控制的参数有？

A.pHB.盐浓度C.流速D.温度

9.ProteinA可结合的蛋白有？

A.人源单抗B.鼠源IgGC.Fc融合蛋白D.白蛋白

10.层析介质修饰方法包括？

A.交联B.配基偶联C.表面改性D.灭菌处理

答案

1.ABCD；2.AB；3.ABC；4.ABCD；5.ABCD；6.ABC；7.ABCD；8.ABCD；9.ABC；10.ABC

四、判断题（共10题，每题2分，共20分）

1.高盐浓度促进离子交换蛋白结合（）

2.ProteinA只结合人源单抗（）

3.琼脂糖孔径与交联度无关（）

4.疏水层析需低盐上样（）

5.硅胶适合分离大分子蛋白（）

6.GMP要求介质可追溯（）

7.亲和洗脱只能用特异性试剂（）

8.层析柱装填常用匀浆法（）

9.DEAE是阳离子交换介质（）

10.层析介质保存需避免冻融（）

答案

1.×；2.×；3.×；4.×；5.×；6.√；7.×；8.√；9.×；10.√

五、简答题（共4题，每题5分，共20分）

1.简述离子交换介质的选择原则。

答案：①电荷类型：缓冲液pH＞蛋白pI（带负电）选阴离子交换（DEAE、Q），pH＜pI（带正电）选阳离子交换（CM、SP）；②介质特性：考虑动态载量、粒径（小粒径载量高但柱压低）、耐化学性（交联琼脂糖耐碱）；③法规与兼容性：符合GMP（无菌、无热原），与下游工艺兼容。

2.比较琼脂糖与硅胶载体的差异。

答案：①亲水性：琼脂糖好（适合蛋白），硅胶差（适合小分子）；②耐化学性：琼脂糖耐弱酸碱，硅胶不耐碱（pH＞8溶解）；③孔径：琼脂糖可调（匹配蛋白大小），硅胶固定；④应用：琼脂糖用于生物大分子，硅胶用于小分子杂质分离。

3.简述ProteinA亲和层析的原理及应用。

答案：原理：ProteinA特异性结合IgG的Fc段（不结合Fab），通过“结合-洗脱”纯化。应用：单抗、Fc融合蛋白