《田间诱导木薯同源四倍体技术规程》.docxVIP

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ICS

FORMTEXT65.020.99

CCS

FORMTEXTGXTC

FORMTEXTB05

FORMTEXT?????团体标准

T/FORMTEXTGXTCFORMTEXTXXXX—FORMTEXT2025

FORMTEXT?????

FORMTEXT田间诱导木薯同源四倍体技术规程

FORMTEXTTechnicalRegulationforInducingAutotetraploidofCassavainField

FORMDROPDOWN

FORMTEXT(本草案完成时间：2025年XX月XX日星期X)

FORMDROPDOWN

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布

FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施

FORMTEXT广西热带作物学会??发布

STYLEREF标准文件_文件编号T/GXTCXXXX—2025

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STYLEREF标准文件_文件编号T/GXTCXXXX—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由广西壮族自治区亚热带作物研究所提出并宣贯。

本文件由广西热带作物学会归口。

本文件起草单位：广西壮族自治区亚热带作物研究所、北海中旺有机农业科技有限公司、江苏三黍生物科技有限公司。

本文件主要起草人：文峰、雷开文、赵鑫鑫、罗燕春、付海天、陈炯宇、王帝、韦丽君、黄建祺、

叶从玉、杨晓文、周文智。

田间诱导木薯同源四倍体技术规程

范围

本文件界定了田间诱导木薯同源四倍体的术语和定义，规定了田间秋水仙素活体诱导木薯多倍体的技术要求。

本文件适用于亚热带区域内秋水仙素活体诱导木薯多倍体。

规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

术语和定义

GB/T20000.1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

多倍体Polyploid

含有三套或三套以上完整染色体组的生物体。

同源四倍体Autotetraploid

细胞内核染色体组为四组的生物为四倍体，其四组染色体来源于同一物种的为同源四倍体。

操作步骤

田间木薯种植

土地经翻晒整理后，于3～4月份选择健康无病虫害的木薯种茎，按株行距0.8m×1m规格种植，当木薯植株达到生长高峰期，即在5～6月份，把植株顶部去掉，促使侧芽萌发。

4.2秋水仙素诱导

去掉植株顶部2d～3d后，侧芽萌动，用脱脂棉将其腋芽生长点包裹。采用4g/L～6g/L的秋水仙素分别处理木薯的腋芽生长点，每个品种3株，每株3个侧芽，每天早上8：30～9：30进行处理，隔天滴一次，每次1～2滴，连续5次后，将脱脂棉去掉，及时将未处理的侧芽摘除，保证营养集中供给处理枝条。

4.3扦插繁殖

4.3.1沙床准备

基质选择干净、透气性佳、含水量高的河沙（沙粒的最大直径在3mm以下）为宜，沙床宽、高分别为1.2m、15cm左右。沙床上在扦插前做好消毒工作，选择0.5%高锰酸钾水溶液3g/m2左右喷洒沙床，要求喷匀、喷透，以确保沙床消毒的效果。24h后喷清水淋洗1次，3h～4h后即可实施扦插操作。

4.3.2嫩枝扦插

对处理枝条的叶片进行观察，变异稳定的四倍体木薯叶片形态特征表现为掌状裂片变短、变厚、变宽、叶形指数变小、颜色加深（见图1）。取叶片表型稳定的枝条切成带2～3个芽的枝段扦插于沙床中，喷水喷透。

4.3.3插后管理

在苗床上设置阴棚，要经常检查和喷水，保持温度20℃～25℃，相对湿度80%～85%，遇到暴雨天气要及时清沟排涝。扦插后每隔半个月可结合喷水喷洒2次～3次1000倍的多菌灵，防止病害发生。扦插苗生根后可逐步揭去遮阴物以延长光照。在扦插苗生根后每隔7d～10d，喷施0.1%～0.2%稀薄尿素液，使扦插苗生长健壮。

4.3.4扦插繁殖

继续观察长出的叶片形态，叶片表型畸形或正常二倍体特征的枝条拔掉，叶片表型稳定的枝条继续繁殖，繁殖4～5代，木薯叶片均表现稳定的四倍体木薯叶片形态特征（见图1）的扦插苗进行倍性鉴定。

4.4倍性鉴定

4.4.1流式细胞仪鉴定

取繁殖4～5代后木薯叶片均表现稳定的四倍体木薯叶片形态特征的叶片，嫩叶最佳。以二倍体材料作为对照，使用流式细胞仪进行倍性检测。取少量待测叶片于小塑料皿中，加入0.5ml的PartecHR-A缓冲液，用刀片将叶片切碎后放置3mi