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研究报告

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二重环介导等温扩增法快速检测鸭肉中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌

一、引言

1.1研究背景

(1)随着全球人口的快速增长和生活方式的改变，食品安全问题日益凸显，其中食品中的微生物污染尤为严重。微生物污染是导致食物中毒的主要原因之一，每年都有大量人群因食用受污染的食品而患病。鸭肉作为一种常见的肉类产品，其消费量逐年上升，因此，鸭肉中微生物污染的检测与控制显得尤为重要。金黄色葡萄球菌和沙门氏菌是两种常见的食源性致病菌，它们可以引起严重的食物中毒，对公众健康构成严重威胁。

(2)据世界卫生组织（WHO）统计，每年全球约有5亿人因食源性疾病而患病，其中约120万人因此死亡。在中国，食源性疾病也是导致人群健康问题的重要原因之一。据中国国家食品安全风险评估中心的数据显示，2019年，中国共发生食源性疾病事件约4.6万起，涉及人数超过100万人。在这些事件中，鸭肉及其制品的污染事件占比较高，其中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌是主要的致病菌。例如，2018年，某地一家鸭肉加工厂因沙门氏菌污染导致数百人感染，造成了严重的社会影响和经济损失。

(3)为了确保食品安全，各国政府和相关机构都制定了一系列食品安全法规和标准，对食品中的微生物污染进行了严格的限制。例如，中国《食品安全法》规定，食品中不得检出金黄色葡萄球菌和沙门氏菌。然而，由于鸭肉生产过程中的各个环节可能存在污染风险，如养殖、加工、运输和销售等，金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检测和防控工作仍然面临巨大挑战。因此，开发快速、灵敏、准确的检测方法对于保障食品安全具有重要意义。二重环介导等温扩增法作为一种新型的分子生物学检测技术，具有快速、简便、成本低廉等优点，有望在鸭肉中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检测中发挥重要作用。

1.2鸭肉中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的危害

(1)金黄色葡萄球菌是一种革兰氏阳性球菌，广泛存在于人类和动物的皮肤、鼻腔、咽喉等部位。在食品中，金黄色葡萄球菌及其产生的肠毒素是引起食源性疾病的主要因素之一。据世界卫生组织报告，金黄色葡萄球菌感染引起的食源性疾病占全球食源性疾病总量的15%以上。鸭肉在加工和储存过程中，如处理不当，容易成为金黄色葡萄球菌的滋生地。例如，2017年，某地一家鸭肉餐厅因金黄色葡萄球菌污染导致30余人出现急性胃肠炎症状，包括恶心、呕吐和腹泻等。

(2)沙门氏菌是一种革兰氏阴性杆菌，广泛存在于动物的肠道中，包括家禽和家畜。鸭肉作为水禽，同样可能携带沙门氏菌。沙门氏菌感染后，人体会出现发热、腹泻、腹痛等症状，严重时可导致败血症、脑膜炎等严重并发症。据统计，沙门氏菌感染在全球范围内每年导致约190万人患病，其中约5.9万人死亡。在中国，沙门氏菌感染也是常见的食源性疾病之一，每年都有大量的病例报告。例如，2019年，某地一家鸭肉批发市场因沙门氏菌污染导致数十人感染，引发了公共卫生事件。

(3)鸭肉中的金黄色葡萄球菌和沙门氏菌不仅对人类健康构成威胁，还可能对经济发展造成负面影响。食物中毒事件的发生会导致消费者对鸭肉及其制品的信任度下降，影响相关产业的销售和市场占有率。此外，食品安全事故的处理费用、医疗费用以及可能的诉讼费用等，都给受害者和相关企业带来了沉重的经济负担。因此，对鸭肉中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的检测和控制，不仅有助于保障公众健康，也是维护产业稳定和经济发展的重要举措。

1.3二重环介导等温扩增法简介

(1)二重环介导等温扩增法（TwistAmp?StaphPlus和TwistAmp?Salmonella）是一种新型分子生物学检测技术，它结合了等温扩增和分子信标技术，能够在没有传统PCR设备的情况下，快速、准确地检测细菌。该技术利用特殊的引物和分子信标，通过等温反应直接在样本中扩增目标DNA序列，整个过程在37°C左右进行，大大缩短了检测时间。据研究数据显示，该技术的检测时间可以缩短至1小时左右，是传统PCR检测时间的几十分之一。

(2)二重环介导等温扩增法的优势在于其操作简便、成本低廉、对设备要求低，特别适合在资源有限的环境下进行快速检测。例如，在非洲等发展中国家，由于缺乏先进的实验室设备，传统的PCR检测方法难以普及。而二重环介导等温扩增法因其独特的等温特性，可以在没有PCR仪的条件下进行，这对于提高这些地区的食品安全检测能力具有重要意义。在实际应用中，该技术已被用于检测多种食品中的病原微生物，包括金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌等，并取得了良好的效果。

(3)二重环介导等温扩增法的案例之一是在2015年，某地区发生了一起重大的鸭肉沙门氏菌污染事件，导致数百人感染。由于事件发生突然，传统的PCR检测方法无法满足快速检测的需求。在这种情况下，当地卫生部门采用了二重环介导等温扩增法进行快速检测，成功地