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2026年生物技术员面试题及实验操作含答案

一、选择题（共10题，每题2分，共20分）

考察内容：基础知识、行业法规、实验原理

1.以下哪种方法最适合用于PCR扩增小片段DNA？

A.巢式PCR

B.实时荧光定量PCR

C.长程PCR

D.不对称PCR

答案：A

解析：巢式PCR通过两次PCR扩增，可提高对小片段DNA的检测灵敏度，适用于低丰度模板。

2.在细胞培养过程中，添加血清的主要作用是？

A.提供生长因子

B.维持pH稳定

C.促进细胞增殖

D.以上都是

答案：D

解析：血清含有多种生长因子、激素和氨基酸，可支持细胞生长和维持培养环境。

3.以下哪种酶可用于DNA测序？

A.DNA聚合酶

B.DNA连接酶

C.DNA限制性内切酶

D.RNA聚合酶

答案：A

解析：DNA测序依赖DNA聚合酶延伸引物，合成互补链并标记荧光标记。

4.生物安全柜的级别分为？

A.Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级

B.Ⅰ级、Ⅱ级

C.Ⅱ级、Ⅲ级

D.Ⅰ级、Ⅳ级

答案：A

解析：Ⅰ级为开放式，Ⅱ级为负压，Ⅲ级为全封闭，适用于高风险操作。

5.ELISA实验中，酶标二抗的作用是？

A.直接检测抗原

B.增强信号放大

C.封闭非特异性结合位点

D.固定样品

答案：B

解析：二抗结合一抗，通过酶催化底物显色，实现信号放大。

6.基因编辑技术CRISPR-Cas9的原理是？

A.通过RNA引导切割DNA

B.依赖同源重组修复

C.利用锌指蛋白识别序列

D.以上都是

答案：A

解析：Cas9蛋白结合gRNA识别目标序列并切割DNA，引导细胞修复。

7.微生物培养时，高压蒸汽灭菌的适用温度是？

A.100℃

B.121℃

C.150℃

D.180℃

答案：B

解析：121℃在15psi压力下可杀灭耐热芽孢。

8.以下哪种方法可用于蛋白质纯化？

A.离子交换层析

B.凝胶电泳

C.亲和层析

D.以上都是

答案：D

解析：三种方法均用于蛋白质分离纯化，凝胶电泳主要用于检测。

9.细胞凋亡的标志性特征是？

A.细胞膜破裂

B.线粒体膜电位下降

C.核染色质浓缩

D.以上都是

答案：D

解析：凋亡涉及膜变化、线粒体损伤和DNA片段化。

10.中国生物安全柜国家标准GB19489规定，Ⅱ级B型柜的排风方式是？

A.前窗开口排风

B.后窗开口排风

C.侧窗开口排风

D.无排风

答案：A

解析：Ⅱ级B型柜通过前窗开口排风，保持操作区域洁净。

二、填空题（共10题，每题1分，共10分）

考察内容：实验术语、操作规范

1.PCR反应体系中，dNTPs是指______。

答案：脱氧核糖核苷三磷酸

解析：PCR需四种dNTP（A、T、C、G）作为合成模板。

2.细胞培养的CO?浓度通常控制在______。

答案：5%

解析：CO?维持培养液pH（约7.4）。

3.基因芯片技术主要用于______分析。

答案：基因表达

解析：可检测大量基因同时表达水平。

4.限制性内切酶识别的序列通常具有______。

答案：回文结构

解析：酶切位点对称，正向反向序列相同。

5.细胞冻存时，常用______作为保护剂。

答案：DMSO（二甲基亚砜）

解析：降低细胞内冰晶形成，提高存活率。

6.ELISA实验中，HRP（辣根过氧化物酶）常用底物是______。

答案：TMB（三联吡啶钌）

解析：显色反应稳定，灵敏度较高。

7.蛋白质印迹（WesternBlot）中，首先需将蛋白质转移至______。

答案：PVDF膜或NC膜

解析：增强抗体结合信号。

8.基因克隆常用载体是______。

答案：质粒

解析：小分子环状DNA，易复制和筛选。

9.细胞凋亡的执行者是一族酶，称为______。

答案：半胱天冬酶（Caspase）

解析：级联激活导致凋亡。

10.中国GMP（药品生产质量管理规范）要求洁净区空气换气次数不少于______。

答案：10次/小时

解析：确保空气洁净度。

三、简答题（共5题，每题4分，共20分）

考察内容：实验设计、原理理解

1.简述PCR实验的基本步骤及其原理。

答案：

-变性（95℃）：高温使DNA双链分离。

-退火（55-65℃）：引物结合目标序列。

-延伸（72℃）：Taq酶合成互补链。

原理：利用温度循环实现DNA扩增，特异性依赖引物序列。

2.为什么细胞培养需要无菌操作？请列举三种无菌操作措施。

答案：

细胞易被杂菌污染导致实验失败。措施：

-使用超净工作台或生物安全柜。

-高压灭菌所有器皿和培养基。

-操作前手部和器械消毒（酒精、火焰）。

3.ELISA实验中，如何避免非特异性结合？

答案：

-封闭非特异性位点（如用BSA或明胶）。

-优化抗体浓度和孵育时间。

-使