环境监测与评价第2讲_色谱分析技术.pptVIP

以气相色谱为例分配比：k=1样品量：一个单位塔板理论的优点和不足：速率理论指出：5.2.2提高容量因子kk?,k/(1+k)?(趋于1），R?,tR?.k的最佳范围1k10GC：改变柱温、相比改变k的方法HPLC：改变流动相溶剂组成当k10时，随容量因子增大，分离度的增加是微乎其微的。一般取k为2~10最宜。5.2.3提高选择性因子???，柱选择性?，分离效果?。由基本色谱方程式判断，当?=1时，R=0。这时，无论怎样提高柱效也无法使两组分分离；?略大于1，两组分才可能分离；?＞2~5，分离比较容易实现。?从1.01增大到5，（?-1）/?增加近100倍；?的微小变化，就能引起分离度的显著变化。?对tR的影响非常显著，?从1.05增加到1.10，分离时间缩短至四分之一。保持k在1~10的范围内，欲提高?值可以此采取下述技术措施：改变流动相组成，主要适用于以HPLC为代表的各种液相色谱方法。改变柱温：柱温既影响色谱动力学因素，又影响热力学因素，是优化分离的重要操作条件，特别是对气相色谱。柱温降低，?升高。改变固定相：这是提高选择性因子的有效方法，特别是气液色谱。5.2.4固定液及配比分离气体及低沸点组分可采用液/担比为10％～25％配比，其他组分采用5～20％配比为宜。5.2.5柱温对于气体及气态烃等低沸点组分，柱温可在室温或50℃以下，固定液配比在15％～25％；对于沸点为100～200℃的混合物，柱温可稍低于其中高沸点组分的沸点，固定液配比10％～15％；对于沸点为200～300℃的混合物，柱温可稍低于各组分的沸点，即在150～200℃。因在较低柱温下分析高沸点组分，故固定液配比要低，一般为5％～10％；对于沸点在300～400℃的高沸点混合物，可在200～250℃柱温下，使用小于3％的固定液配比；对于沸程宽的多组分混合物，可使用程序升温法。即在分析过程中，按一定速度提高柱温。5.2.6载气及流速选择载气首先要考虑它是否适合所用检测器。若检测器对载气无特殊要求，选择分子量大的载气（N2或Ar等）可以使速率方程的（B=2γDg）的影响减小，从而提高柱效。但是载气流速较高时，应选用分子量小的气体作为载气。载气流速（u）与塔板高（H）存在如下关系：式中，A为涡流扩散项（截距），与u无关；纵向扩散B/u为双曲线与其渐近线之间的垂直距离；而渐近线与截距之间的距离为气相传质阻力与液相传质阻力（Cg+Cl）u对H的作用。由上式可知，纵向扩散与气相传质阻力项均与组分在载气中的扩散系数Dg有关，而Dg随载气分子量的加大而减小。5.2.7进样进样量与气化温度，柱容量及仪器的线性响应范围等因素有关。进样量要适当，此时，分配系数K保持一个常数，所得色谱峰形对称，在一定操作条件下保留值恒定。若进样量太大，峰形不对称程度增加且保留值也发生变化；若太小，会因检测器灵敏度不够而不能检出。另外，进样量的大小直接关系到谱带的初始宽度，初始宽度越大，经过柱内外展宽后，进入检测器的最终带宽也就越大，越不容易分离。进样量应控制在能瞬间气化，达到规定分离度要求和线性响应的允许范围之内。填充柱淋洗法的瞬间进样量为液态，一般为0.01～10μl；气体样品一般为0.1～10μl为宜。进样操作要迅速，使样品在汽化室中立刻全部汽化成蒸汽，被载气带入色谱柱；进样缓慢会造成峰形扩能，不利于分离进样器读数要准确。Back5.3定性分析法常用的定性方法主要有以下几种：（1）保留值定性：在固定相及操作条件下恒定时，每种组分都有恒定保留值，可作为定性依据。①绝对保留值法：又分为保留时间法和保留体积法，此法必须严格控制在柱长、柱温、固定液配比及载气流等因素一致的情况下操作。②相对保留值法：在某一固定相及柱温下，分别测组分及基准物（或标准）S的调整保留值，求出其相对保留值，即可定性比较，文献中能查到某些组分的相对保留值。（2）加已知