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巨龙竹生殖生物学研究

摘要

本文通过石蜡切片等方法，对巨龙竹生殖器官结构、大小孢子的发生和雌、雄配子体的发育过程进行观察研究。巨龙竹为一心皮组成的单室单子房，子房内具一个倒生、双珠被、厚珠心的胚珠。大孢子母细胞减数分裂形成线形排列的4个大孢子，合点端大孢子具功能，胚囊发育为蓼型，具多个反足细胞。花药壁由表皮、药室内壁、中层、绒毡层4层结构组成，发育为单子叶型，绒毡层为腺质型。小孢子母细胞减数分裂胞质分裂为连续型，四分孢子为四面体型，成熟花粉粒为2细胞型，具1个萌发孔。小穗发育雌雄异熟，雌蕊发育早于雄蕊。本文初步解释了巨龙竹结实率低的原因，为其育种工作奠定基础。

关键词

巨龙竹；生殖器官；大孢子发生；小孢子发生；雄配子体；雌配子体

一、引言

竹类植物一般开花周期较长，多数竹子一生只开一次花，且开完花即死亡，部分竹种结实率很低甚至不结实，这给竹类植物的胚胎发育研究带来极大困难，相关报道文献较少。巨龙竹（DendrocalamussinicusChiaetJ.L.Sun）作为禾本科竹亚科牡竹属大型热带丛生竹，是世界上最高大的竹子，具有极高的利用前景和开发价值。然而，其天然更新困难，主要原因在于其开花周期长、结实率低。近期，巨龙竹在云南西盟、沧源等地陆续出现零星开花、结实现象，为研究其有性生殖提供了契机。本文旨在通过对巨龙竹生殖生物学的研究，深入了解其生殖过程，为解决结实率低的问题及后续育种工作提供理论依据。

二、材料与方法

2.1材料来源

试验材料采自云南省沧源佤族自治县境内的南滚河国家级自然保护区，该地区海拔平均约1100m。2004年7月中旬开始，采集不同发育时期的巨龙竹小穗。

2.2实验方法

固定与保存：采集的小穗用FAA固定液固定并抽气，随后置于4℃冰箱保存。

解剖与制片：对小穗进行解剖，取出雌雄蕊进一步固定。采用常规石蜡连续制片技术，切片厚度控制在7-8μm，使用番红——固绿染色，最后用加拿大树胶封片。

观察与记录：利用ZEISS显微摄影仪对制片进行观察并照相记录。

三、巨龙竹生殖器官形态结构

3.1小穗结构

巨龙竹成熟小穗呈紫褐色，最宽处平均直径约0.9cm，长度约3.8cm，每个小穗一般着生6-7朵花。每朵花包含1片外稃、1片内稃以及两片难以用肉眼分辨的浆片。内稃与外稃的外表皮及边缘覆盖绒毛。

3.2雌蕊结构

巨龙竹的雌蕊由一心皮构成单室单子房，子房内仅有一个胚珠。该胚珠为倒生型，具有双珠被和厚珠心。大孢子母细胞经过减数分裂，形成呈线形排列的4个大孢子，其中合点端的大孢子具有功能。胚囊的发育类型为蓼型，具有多个反足细胞。在胚体形成时期，仍能观察到少量反足细胞存在。

3.3雄蕊结构

巨龙竹的花药壁由4层结构组成，从外到内依次为表皮、药室内壁、中层和绒毡层。花药壁发育遵循单子叶型模式，绒毡层属于腺质型。小孢子母细胞在减数分裂过程中，胞质分裂方式为连续型，形成的四分孢子呈四面体型。成熟花粉粒为2细胞型，且具有1个萌发孔。

四、大小孢子发生及雌、雄配子体发育

4.1大孢子发生及雌配子体发育

大孢子母细胞减数分裂产生4个大孢子，呈线形排列，仅合点端的大孢子发育为功能大孢子。功能大孢子经过三次有丝分裂，形成7细胞8核的蓼型胚囊，包括1个卵细胞、2个助细胞、3个反足细胞和1个含2个极核的中央细胞。反足细胞数量较多，在胚体形成期仍有部分存在。

4.2小孢子发生及雄配子体发育

小孢子母细胞经减数分裂形成四面体型的四分孢子，随后四分孢子彼此分离，发育为单核花粉粒。单核花粉粒进行一次有丝分裂，形成含有1个营养核和1个生殖核的2细胞型成熟花粉粒，生殖核再进行一次有丝分裂，形成2个精子，但在成熟花粉粒中仅观察到1个生殖核和1个营养核。巨龙竹花粉寿命较短，在离体条件下，其萌发率在短时间内迅速下降，一段时间后完全丧失萌发能力。

五、传粉与受精

巨龙竹小穗发育呈现雌雄异熟特征，雌蕊的发育早于雄蕊。传粉时期，花粉借助风力等媒介传播到雌蕊柱头上。然而，由于巨龙竹花粉生活力持续时间短暂，在野外自然条件下，受阳光、水分及温度等多种因子影响，其花粉生活力可能更低，这在一定程度上影响了受精成功率，导致结实率降低。

六、结实特性与果实解剖

6.1结实特性

巨龙竹自然结实率较低，尽管在部分地区出现开花结实现象，但实际获得的种子数量有限。

6.2果实解剖

巨龙竹果实的胚位于胚乳一侧下方，与胚乳紧密相接。胚型公式为特定类型，即胚体中进入盾片和进入胚芽的维管束在同一个分歧点分开，外胚叶存在，盾片与胚根鞘相互分离，胚芽横切面中真叶维管束数目较多，且真叶两端重叠。大角胚芽、大角胚根、大弯胚，显示其在禾本科中属于较原始的类型