人教生物选修三基因工程知识点及习题.docxVIP

基因工程的概念

基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，经过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特征，发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

（一）基因工程的基本工具

1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）

（1）起源：重要是从原核生物中分离纯化出来的。

（2）功效：可以识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，而且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，所以具备专一性。

（3）成果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶

(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coliDNA连接酶起源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；

而T4DNA连接酶起源于T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运送车”——载体

（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具备一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具备标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）最常用的载体是质粒,它是一个裸露的、结构简朴的、独立于细菌染色体之外，并具备自我复制能力的双链环状DNA分子。

（3）其它载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒

(二)基因工程的基本操作程序

第一步：目标基因的获取

1.目标基因是指：编码蛋白质的结构基因。

直接分离取得，真核基因是人工合成。人工合成目标基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。

（1）原理：DNA双链复制

（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

第二步：基因体现载体的构建

1.目标：使目标基因在受体细胞中稳定存在，而且可以遗传至下一代，使目标基因可以体现和发挥作用。

2.构成：目标基因＋开启子＋终结子＋标记基因

（1）开启子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终取得所需的蛋白质。

（2）终结子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目标基因，从而将含有目标基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。

第三步：将目标基因导入受体细胞_

1.转化的概念：是目标基因进入受体细胞内，而且在受体细胞内维持稳定和体现的过程。

2.常用的转化方法：

将目标基因导入植物细胞：采取最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。

将目标基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。

将目标基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的因素是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+解决细胞，使其成为感受态细胞，再将重组体现载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。

3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因体现载体受体细胞的依据是标记基因是否体现。

第四步：目标基因的检测和体现

转基因生物的染色体DNA上是否插入了目标基因，方法是采取DNA分子杂交技术。

目标基因是否转录出了mRNA，方法是采取用标记的目标基因作探针与mRNA杂交。

目标基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。

个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。

（三）基因工程的应用

1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，运用转基因改良植物的品质。

2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。

3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因体现产物发挥作用。

（四）蛋白质工程的概念

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功效的关系作为基础，经过基因修饰或基因合成，对既有蛋白质进行改造，或制造一个新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）

转录翻译

高中生物选修3第一章基因工程习题

一．单项选择题：每小题只有一个选项最符合题意。

1．以下关于基因工程的叙述，对的的是：（）

A．DN