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第36讲基因工程、生物技术的安全性与伦理问题第十二单元生物技术与工程

课标要求1.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具2.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测、鉴定等步骤3.概述人们根据基因工程原理，进行蛋白质设计和改造，可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质4.举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用而改善了人类的生活品质

课标要求5.举例说出日常生活中的转基因产品，探讨转基因技术在应用过程中带来的影响6.举例说出生殖性克隆人面临的伦理问题，分析说明我国为什么不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验7.举例说明历史上生物武器对人类造成了严重的威胁与伤害，认同我国反对生物武器及其技术和设备的扩散?

基因工程的概念:基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫重组DNA技术。1.别名:2.原理:3.操作对象:4.操作水平:5.结果:重组DNA技术基因分子水平基因重组赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品

考点一重组DNA技术的基本工具1.限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)原核生物数千特定核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端AATTC—G—AATT—黏性末端的写法:

(1)源于选择性必修3P71“旁栏思考”:原核生物中存在限制酶的意义是什么？原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原物的危害。(2)源于选择性必修3P74“拓展应用”:限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。

2.DNA连接酶磷酸二酯键大肠杆菌黏性末端黏性末端DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？

AATTGCAATTAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶4.DNA聚合酶的作用

DNA连接酶DNA聚合酶作用实质化学本质不同点模板 用途都能催化形成磷酸二酯键都是蛋白质 不需要需要DNA的一条链作模板形成完整的重组DNA分子形成与模板链互补的DNA链,形成新的双链DNA分子基因工程DNA复制只能催化单个核苷酸连接到已有的核酸片段3’末端羟基上,形成磷酸二酯键催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键DNA连接酶与DNA聚合酶的比较相同点作用对象作用结果

3.载体环状双链DNA分子噬菌体有一个至多个自我复制受体DNA标记

基因工程中使用质粒的特点:在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是天然质粒的基础上进行过__________的；这些质粒上常有特殊的标记基因，便于_______________________；人工改造重组DNA分子的筛选

图解限制酶的选择原则(1)不破坏目的基因原则:如图甲中可选择，而不选择。(2)保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则:质粒作为载体必须具备标记基因，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中不选择。PstⅠSmaⅠSmaⅠ

图解限制酶的选择原则(3)确保出现相同黏性末端原则:通常选择与切割目的基因相同的限制酶，如图甲中；为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择两种限制酶。PstⅠPstⅠ和EcoRⅠ

【检测】(2022·青岛市高三期中)下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，由此推断以下说法中，错误的是()注:Y为C或T，R为A或G。限制酶名称识别序列和切割位点限制酶名称识别序列和切割位点BamHⅠG↓GATCCKpnⅠGGTAC↓CEcoRⅠC↓AATTCSau3AⅠ↓GATCHindⅡGTY↓RACSmaⅠCCC↓GGGA.HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶切割后形成平末端B.Sau3AⅠ限制酶的切割位点在识别序列的外部C.BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列DHindⅡ能识别GTCAAC，也能识别GTTAAC

【检测】第三代疫苗——DNA疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因(如图甲)插入到