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合成生物抗菌肽研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

填空题

1.阳离子抗菌肽通常带______电荷，易与细菌细胞膜结合。

2.合成抗菌肽的两种主要方法是化学合成和______。

3.抗菌肽的常见二级结构包括α-螺旋和______。

4.最低抑菌浓度的英文缩写是______。

5.固相合成抗菌肽常用的保护基策略是______（Fmoc）。

6.基因工程表达抗菌肽常与______蛋白融合以降低毒性。

7.天然抗菌肽的重要来源包括昆虫、植物和______。

8.毕赤酵母表达系统可实现抗菌肽的______表达，便于纯化。

9.抗菌肽破坏细菌细胞膜的主要方式是形成______。

10.液相合成抗菌肽适合长度______的肽链（填“50aa”或“50aa”）。

单项选择题

1.以下哪种不是抗菌肽的抗菌机制？

A.破坏细胞膜B.抑制细胞壁合成C.抑制核酸复制D.促进细胞增殖

2.固相合成抗菌肽中，脱除Fmoc保护基的试剂是？

A.TFAB.哌啶C.盐酸D.醋酸

3.以下哪种宿主不常用于基因工程表达抗菌肽？

A.大肠杆菌B.毕赤酵母C.哺乳动物细胞D.枯草芽孢杆菌

4.抗菌肽与传统抗生素相比，核心优势是？

A.广谱抗菌B.低毒性C.不易耐药D.易降解

5.检测抗菌肽活性的常用方法是？

A.MIC测定B.ELISAC.WesternblotD.PCR

6.富含半胱氨酸的抗菌肽是？

A.CecropinB.DefensinC.MagaininD.Thionin（植物来源）

7.液相合成抗菌肽的常用缩合试剂不包括？

A.DCCB.HBTUC.TFAD.DIC

8.抗菌肽的长度通常为？

A.5-10aaB.10-50aaC.50-100aaD.100aa

9.以下哪种生物是抗菌肽的天然来源？

A.家蚕B.大肠杆菌C.酿酒酵母D.小鼠（仅选项）

10.融合表达抗菌肽的目的不包括？

A.提高表达量B.便于纯化C.增强活性D.降低毒性

多项选择题

1.抗菌肽的分类依据包括？

A.来源B.结构C.电荷D.抗菌谱

2.基因工程表达抗菌肽的常用宿主有？

A.大肠杆菌B.毕赤酵母C.昆虫细胞D.枯草芽孢杆菌

3.抗菌肽的应用领域包括？

A.医药B.农业C.食品防腐D.化妆品

4.影响抗菌肽活性的因素有？

A.氨基酸序列B.二级结构C.电荷D.疏水性

5.固相合成抗菌肽的关键步骤包括？

A.树脂连接B.氨基酸偶联C.脱保护D.裂解纯化

6.抗菌肽活性检测的指标有？

A.MICB.MBCC.IC50D.EC50

7.属于阳离子抗菌肽的是？

A.CecropinB.DefensinC.MagaininD.阴离子抗菌肽（排除）

8.抗菌肽的非膜作用机制包括？

A.抑制蛋白合成B.抑制核酸复制C.激活自溶酶D.破坏细胞壁

9.毕赤酵母表达系统的优势是？

A.分泌表达B.翻译后修饰C.高表达量D.成本低

10.抗菌肽研发涉及的生物信息学方法有？

A.序列比对B.结构预测C.分子对接D.活性位点分析

判断题

1.所有抗菌肽都带正电荷。（×）

2.固相合成可实现抗菌肽大规模生产。（×）

3.MIC是最低杀菌浓度。（×）

4.大肠杆菌表达抗菌肽需融合表达。（√）

5.抗菌肽对真菌无活性。（×）

6.毕赤酵母可分泌抗菌肽。（√）

7.液相合成适合长肽（50aa）。（√）

8.抗菌肽易产生耐药性。（×）

9.天然抗菌肽仅来源于动物。（×）

10.环化可提高抗菌肽稳定性。（√）

简答题

1.简述化学固相合成抗菌肽的基本流程。

答案：采用Fmoc策略，流程为：①树脂活化（如Wang树脂）与第一个氨基酸偶联；②哌啶脱除Fmoc保护基；③依次偶联后续氨基酸（HBTU/DIPEA缩合）；④TFA/苯酚裂解肽链并脱除侧链保护基；⑤反相HPLC纯化粗肽；⑥MIC测定验证活性。关键是每步偶联效率检测（茚三酮法），确保序列正确。

2.基因工程表达抗菌肽为何常融合表达？

答案：①降低毒性：抗菌肽对宿主（如大肠杆菌）有毒，融合后减弱毒性；②稳定肽链：小肽易被蛋白酶降解，融合载体蛋白（GST/His-tag）增强稳定性；③便于纯化：标签可通过亲和层析（镍柱）分离；④提高表达量：载体蛋白增强转录翻译效率。融合后需用thrombin切除标签获得活性肽。

3.抗菌肽的主要抗菌机制是什么？

答案：①膜作用：阳离子肽与细菌膜（负电）静电结合，插入形成孔道，破坏膜完整性，导致内容物泄漏；②非膜作用：进入细胞抑制细胞壁合成、核酸复制、蛋白合成，或激活自溶酶。不同肽可能结合多种机制，广谱肽多依赖膜作用。

4.抗菌肽相比传统抗生素的优势与不足？

答案：优势：①不易耐药（靶点多）；②低毒性（真核膜电荷差异）；③广谱（细菌、真菌、病毒）；④易降解（环境友好）。不足：①成本高（合成贵/表达量低）；②稳定性差（易被蛋白酶降解）；③体内活性