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铁蛋白操作流程

1目的

明确铁蛋白检测的操作规程，指导检验人员正确进行铁蛋白的检测。

2.适用范围：

2.1适用于铁蛋白检测的检验人员。

2.2适合仪器：RocheModularE170ECL2010cobase601

2.3适用试剂:RocheFER2010/E170/e601

3方法原理：

采用双抗体夹心法原理

·第1步：15µl标本、生物素化的抗铁蛋白单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗铁蛋

白单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。

·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉

亲和素间的反应结合到微粒上。

·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物

质被液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进定。

·检测结果由机器自动从曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由

从试剂条形码扫描入仪器的原版曲线而得。

4临床应用

铁蛋白的分子量较大（440KD），由含24个亚单位的蛋白质外壳（脂铁蛋白）以

及含约2500个Fe3+离子的铁两部分组成（在肝脏和脾脏中的铁蛋白）。铁蛋

白有形成聚合体的倾向，一旦在的细胞中过量存在时,易浓缩成半结晶

状的血铁并出现在溶酶体中。在治疗初期检测铁蛋白可反映当时体内铁的储

量，可以早期发现网织内皮系统的不足。在临，20ng/ml的阈值可

以有效地判断准潜伏期铁不足并提示铁的耗竭。正常情况下铁可用于血

红蛋白的合成。低于12ng/ml的铁蛋白阈值时，判断为潜伏期铁不足。如果铁蛋

白水平较高，又排除了供铁不正常的可能性，即反映体内铁过量的状况。400ng/ml

为判断阈值。铁蛋白升高还可见于下列：急性白血病、氏病、肺癌、

结肠癌、肝癌和癌。检测铁蛋白对肝脏转移性有诊断价值，76%的肝

转移铁蛋白含量高于400ng/ml。升高的可能是由于细胞坏死、红细胞生

成被阻断或组织中合成增多。

5样品要求：

：按常规方法。

血浆：肝素(锂、钠),EDTA-K3或枸橼酸钠抗凝。其中用枸橼酸钠抗凝的血浆，测

定结果需+10%。标本在2－8度可稳定7天，-20度可稳定12个月。含沉淀的标本使

用前需离心。不要使用加热灭活的标本。

6定标

每批FER试剂有一条形码，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用

ElecsysFER定标液定标。

定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器24小时以内）标定一次，

如再次标定即根据下列要求：

E170/Elecsys2010：

·一个月（同一批号试剂）

·7天（放置仪器上的同一试剂盒）

7质控

Elecsys标志物质控品（PrecicontrolTumorMarker）1(罗氏正常值质控)

Elecsys标志物质控品（PrecicontrolTumorMarker）2(罗氏病理值质控)

质控1和质控2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于

的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，

应采取校正措施。

8试剂准备及稳定期

M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生

物素结合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。

R1：生物素化的抗铁蛋白单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度3.0mg/l，磷酸

缓冲液0.1mol/l，pH7.4。含防腐剂。

2+

R2：Ru(bpy)3标记的抗铁蛋白单克隆抗体