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皮质醇操作流程

1目的

明确皮质醇检测的操作规程，指导检验人员正确进行皮质醇的检测。

2.适用范围：

2.1适用于皮质醇检测的检验人员。

2.2适合仪器：RocheModularE170ECL2010cobase601

2.3适用试剂:RocheCortisol2010/E170/e601

3方法原理：

采用竞争法原理

·第1步：20µl标本与生物素化的抗皮质醇抗体和钌（Ru）标记的皮质醇衍生物

混匀，分别形成复合物，数量取决于标本中待测物的浓度。生物素化的抗皮质醇

抗体一部分与标本中待测物结合，另一部分与Ru标记的皮质醇衍生物结合。

·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒。形成的复合物通过生物素、链酶亲和素

之间的反应结合到微粒上。

·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物

质被液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进定。

·检测结果由机器自动从曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由

从试剂条形码扫描入仪器的原版曲线而得。

4临床应用

皮质醇最重要的的生理机能是升高血糖，抗炎和免疫抑制作用。皮质醇的合成和

分泌受下丘脑－垂体－肾上腺皮质轴的负反馈机制的调节。当皮质醇水平下降

时，下丘脑分泌促肾上腺皮质激素释放激素（CRH），使垂体分泌促肾上腺皮质

激素（ACTH），并由ACTH刺激肾上腺合成并分泌皮质醇。皮质醇本身对垂体和下

丘脑起负反馈作用。另外，机体在应急状态下，皮质醇分泌增加。

皮质醇在血中的含量呈现昼夜的周期性变化。在清晨含量达到最700nmol/l

或25.4mg/dl），随后在白天含量逐渐下降，到夜间含量降到最低点，大约是峰

值的一半。因此，在分析结果时，了解采血时间是很重要的。

检测患者血中皮质醇的含量可用于诊断肾上腺、垂体和下丘脑机能紊乱与否。皮

质醇含量增高见于库欣综合征，含量降低见于生病。在对上述疾病进行相应

的地塞抑制治疗或激素替代治疗中，可检测皮质醇含量进行。

5样品要求：

：按常规方法。

血浆：肝素、EDTA或枸橼酸钠抗凝均可。其中用枸橼酸钠抗凝的血浆，测定结果

需+10%。标本在2－8度可稳定5天，－20度可稳定3个月。只能冻融一次。含沉淀

的标本使用前需离心。不要加热灭活标本。

6定标

每批Cortisol试剂有一条形码，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用

ElecsysCortisol定标液定标。

定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器24小时以内）标定一次，

如再次标定即根据下列要求：

E170/Elecsys2010：

·一个月（同一批号试剂）

·7天（放置仪器上的同一试剂盒）

7质控

Elecsys通用质控品（PreciControlUniversal）1(罗氏正常值质控)

Elecsys通用质控品（PreciControlUniversal）2(罗氏病理值质控)

质控1和质控2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于

的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，

应采取校正措施。

8试剂准备及稳定期

M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生

物素结合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。

R1：生物素化的羊抗皮质醇抗体（灰盖），1瓶，9ml。浓度90ng/ml，MES缓冲液

0.1mol/l，pH6.0。含防腐剂。

2＋

R2：Ru(bpy)3标记的皮质醇-多肽（黑盖），1瓶，9ml。浓度25ng/ml，达那唑

（danazol）20mg/ml，MES缓冲液0.1mol/l