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环境工程微生物学2025综合实验设计卷

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

考生注意：本试卷共分为三个大题，请根据要求完成设计。

一、背景与目的

某工业园区排放的废水含有较高浓度的石油烃类污染物（以总石油烃TPH计），常规活性污泥法处理效果不理想。为提高处理效率，拟采用强化生物处理技术。请针对该废水特性，设计一个实验室规模的强化生物处理实验方案，旨在筛选或强化能够高效降解石油烃的微生物，并初步评估其处理效果。

二、实验方案设计

1.目标微生物选择与依据：阐述你将选择何种类型的微生物（自养菌、异养菌、特定种属等）或构建何种微生态体系来处理该石油烃废水，并说明选择的理论依据（如微生物代谢途径、对石油烃的耐受性、降解效率等）。

2.实验材料与设备：列出所需的主要实验材料（如培养基成分、石油烃标准品、微生物菌种来源等）和设备（如反应器、摇床、pH计、温度计、分光光度计、气相色谱仪等）。

3.实验设计：

*反应器设计：描述你所设计的反应器类型（如批次、连续流、固定床等）、材质、容积、运行方式（如好氧、厌氧、缺氧/anammox等）。

*接种物准备：说明如何获取和准备接种物（如从石油污染土壤/水样中富集、使用商业菌种、纯种接种等）。

*实验流程：详细描述实验的操作流程，包括接种、启动、运行、监测等关键步骤。需明确初始条件（如接种污泥浓度MLSS、进水基质浓度、pH、温度等）。

*对照组设置：设计必要的对照组（如空白对照、只接种不投加石油烃的对照、投加不同浓度石油烃的对照等），并说明理由。

4.关键参数优化（可选）：针对你所选的微生物或工艺，提出1-2个关键参数（如接种量、石油烃浓度、C/N比、pH、温度、曝气量等）的优化方案。

5.效果评价指标与监测方法：明确用于评估处理效果的指标（如TPH去除率、化学需氧量COD去除率、生物需氧量BOD去除率、微生物量变化、石油烃降解产物等），并说明相应的监测分析方法。

6.数据处理与预期结果分析：简述你将如何记录和处理实验数据，并对预期的实验结果进行分析和讨论。

三、综合实验设计

某城市河道受到微塑料污染，同时伴有氨氮和总磷超标。请设计一个综合实验方案，旨在研究微塑料对河道中氨氮去除菌（如硝化菌）和磷去除菌（如聚磷菌）的影响，并探索联合生物处理与微塑料去除的策略。

1.实验目的：清晰阐述本实验的具体研究目的。

2.实验设计思路：阐述你将如何通过实验来分别或同时研究微塑料、氨氮和总磷的去除，以及它们之间的相互作用。

3.实验方法：

*样品采集与富集：描述如何采集河道水样，并富集其中的氨氮去除菌和磷去除菌。

*微塑料添加与分组：说明如何向富集培养液中添加不同类型或浓度的微塑料，设置相应的实验组（如微塑料组、对照组等）。

*生物处理实验：设计具体的生物处理实验（如批次实验或小型连续流实验），监测在微塑料存在与否的条件下，氨氮和总磷的去除过程。

*微生物分析（可选）：如果计划分析微生物群落结构或功能，请简述分析方法（如高通量测序、宏转录组测序等）。

4.指标选择与测定：列出需要监测的关键指标（如水体中微塑料含量、TPH、COD、氨氮浓度、硝态氮浓度、总磷浓度、MLSS等），并说明测定方法。

5.预期结果与讨论：描述你对实验预期结果的预测，并说明你将如何分析和解释这些结果，以回答你的研究目的。

6.潜在问题与对策：分析实验设计中可能遇到的潜在问题（如微塑料难以量化、对微生物的毒性效应复杂等），并提出相应的应对策略。

试卷答案

一、背景与目的

目标微生物选择与依据：选择能高效降解石油烃的异养微生物，特别是具有多种代谢途径（如β-氧化）的假单胞菌属（Pseudomonas）或变形菌属（Proteobacteria）中的某些种。依据：这些微生物普遍存在于自然环境中，对石油烃有较强的耐受性和适应性，能够通过其细胞膜上的外切酶和胞内酶系统（如单加氧酶、双加氧酶）逐步降解石油烃的大分子链，将其转化为小分子中间产物，最终分解为CO2和H2O。选择自养微生物（如硝化细菌）在此直接降解石油烃效率通常较低，但可考虑将其与异养降解菌结合构建复合微生物群落。

实验材料与设备：

*材料：石油烃标准品（如n-癸烷、甲苯等，代表不同碳链长度的烷烃）、无机盐培养基基础、牛肉浸膏或蛋白胨、磷酸盐、硝酸钠、硫酸镁等无机盐、微量元素溶液、微量元素溶液、去离子水、待测石油烃废水样（或模拟油）、微生物菌种（如从油田土壤、沉积物中富集的石油烃降解菌悬液）。

*设备：机械搅拌式恒温反应器（如玻璃材