2026《金版教程》高考复习方案生物经典多选版-第十单元 小单元3 微专题13 PCR技术与电泳相关问题、基因编辑技术.docxVIP

1．PCR技术及其应用

(1)PCR技术与病毒检测

某些病毒感染的常规检测方法是通过实时荧光PCR鉴定。实时荧光PCR扩增目的基因，需额外添加荧光标记探针(一小段单链DNA，可与目的基因中部分序列特异性结合)。当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶分解，R与Q分离后，R发出的荧光可被检测到(如图甲)，通过实时荧光PCR检测这些病毒感染时，检测到的荧光强度变化如图乙。

(2)基因定点突变与基因改造

重叠延伸PCR技术是一项重要的基因定点突变技术，其主要设计思路是用具有互补配对片段的引物(图中的引物2和3，突起处代表与模板链不能互补的突变位点)分别进行PCR，获得有重叠链的两种DNA片段，再在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸获得想要的目的基因。水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因中的特定位点引入特定突变，使水蛭素第47位的天冬酰胺(密码子为AAC、AAU)替换为赖氨酸(密码子为AAA、AAG)，从而提高水蛭素的抗凝血活性。原理如图。

2．基因编辑技术及其应用

CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑，其原理是由一条单链向导RNA(SgRNA)引导内切核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割(如图)。

CRISPR复合体中的SgRNA的主要功能是与靶向基因(目的基因)上特定碱