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鹿茸菇液体菌种生产技术规程

1范围

本规程规定了鹿茸菇（Lyophyllumdecastes）液体菌种生产的术语和定义、规范性引用文件、生产环境与设施要求、原料与试剂要求、生产工艺与操作规范、质量控制、安全卫生要求、环保要求、档案管理及附则。

本规程适用于鹿茸菇液体菌种的实验室制备、扩大培养及规模化生产，涵盖母种活化、一级种子培养、二级种子培养、三级液体菌种培养的全过程，不适用于鹿茸菇固体菌种生产及菌种后续接种栽培环节。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本规程必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本规程；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规程。

GB/T1.1—2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则

GB14881食品生产通用卫生规范

GB5749生活饮用水卫生标准

GB2760食品安全国家标准食品添加剂使用标准

GB2762食品安全国家标准食品中污染物限量

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

NY/T1098食用菌术语

NY/T1257食用菌菌种检验规程

HJ574工业固体废物采样制样技术规范

《中华人民共和国食品安全法》

《中华人民共和国环境保护法》

3术语和定义

下列术语和定义适用于本规程，未定义的术语参照NY/T1098执行。

3.1鹿茸菇液体菌种

以鹿茸菇母种为原始菌种，经活化、扩大培养后，接种到无菌液体培养基中，在适宜的温度、转速、通气量等条件下培养，形成的含大量菌丝体、菌丝球及代谢产物的无菌液体混合物，可直接用于鹿茸菇栽培料接种，具有萌发快、菌丝长势均一、接种效率高的特点。

3.2母种活化

将保藏的鹿茸菇母种，接种到固体斜面培养基上，在适宜条件下培养，使菌丝恢复活性、正常生长，获得健壮母种的过程。

3.3种子培养

将活化后的鹿茸菇母种，逐级接种到液体培养基中，进行扩大培养，获得足量、健壮的菌丝体，为三级液体菌种规模化生产提供种源的过程，分为一级种子培养（摇瓶培养）、二级种子培养（种子罐培养）。

3.4液体深层发酵

在密闭的发酵罐中，通过控制温度、转速、通气量、pH值等参数，使鹿茸菇菌丝体在液体培养基中深层厌氧或兼性厌氧生长，大量繁殖的培养方式，是三级液体菌种生产的核心环节。

3.5无菌操作

在菌种生产全过程中，采取物理、化学等方法杀灭或抑制杂菌（细菌、霉菌、酵母菌等）污染，确保菌种纯度和无菌性的操作规范。

3.6杂菌污染

在鹿茸菇液体菌种生产过程中，混入的非目标微生物（如大肠杆菌、青霉菌、酵母菌等），导致菌种纯度下降、菌丝生长异常，甚至无法使用的现象。

4生产环境与设施要求

4.1厂区环境

厂区应建在地势干燥、通风良好、光照适宜、水源充足、无有害气体、粉尘、放射性物质及其他污染源的区域，远离养殖场、屠宰场、污水处理厂、垃圾填埋场、化工厂等污染源，距离至少500米。

厂区道路应硬化处理，路面平整、无积水，厂区绿化应合理，优先选择无粉尘、无异味、不滋生杂菌的植被，定期修剪，防止蚊虫、霉菌滋生。

厂区应划分独立的母种制备区、种子培养区、发酵生产区、菌种储存区、原料储存区、废弃物存放区、检验区，各区界限清晰，避免交叉污染；废弃物存放区应密闭设置，及时清理，防止异味扩散和杂菌滋生。

4.2车间设施

4.2.1总体要求

生产车间应符合GB14881和NY/T528的要求，采用封闭式设计，墙面、地面、天花板应采用耐腐蚀、易清洗、不易滋生杂菌的材料（如不锈钢、瓷砖、食品级塑料）铺设，地面应具有一定坡度，便于排水和清洁；车间内温度、湿度应可调控，配备有效的通风、净化设施。

4.2.2功能分区设施

母种制备区：应设置无菌操作台、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台等设备，车间空气洁净度应达到10000级，温度控制在22～26℃，相对湿度控制在60%～70%，避免强光直射。

种子培养区：分为摇瓶培养区和种子罐培养区，摇瓶培养区配备摇床、恒温培养室，种子罐培养区配备一级、二级种子罐及配套的灭菌、通气设备，车间应密闭、防潮，配备空气过滤系统，防止杂菌污染。

发酵生产区：配备三级发酵罐、培养基配制罐、灭菌设备、空气压缩机、过滤器、接种设备等，发酵罐应采用不锈钢材质，密封性能良好，配备温度、转速、通气量、pH值等参数的监测和调控系统；车间应保持干燥、洁净，通风良好，设置防杂菌、防蚊虫设施。

菌种储存区：设置低温冷藏库或冰柜，温度控制在0～4℃，用于临时储存合格的液体菌种；库房应干燥、通风、清洁，定期消毒，避免菌种污染和变质。

检验区：配备无菌操作台、显微镜、恒温培养箱、pH计、电子天平、无菌采样设备等，用于菌种纯度、菌丝长势、杂菌检测等，检验区应独立设置，避免与生